[发明专利]焦磷酸测序技术鉴别新城疫病毒强毒株与弱毒株的方法无效
| 申请号： | 200910231533.X | 申请日： | 2009-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN101921869A | 公开（公告）日： | 2010-12-22 |
| 发明（设计）人： | 徐彪;方绍庆;岳志芹;赵玉然;孙涛;张太翔;赵巍;梁成珠 | 申请（专利权）人： | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/76 |
| 代理公司： | 青岛高晓专利事务所 37104 | 代理人： | 于正河 |
| 地址： | 266002 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明属于动物病原检测技术领域，涉及一种采用焦磷酸测序技术鉴别新城疫病毒强毒株与弱毒株的方法，先进行引物设计区分新城疫病毒强毒株与弱毒株的特异性引物及焦磷酸测序引物；再提取待测样品的核糖核酸，用特异性引物进行逆转录-聚合酶链式反应扩增，再进行琼脂糖凝胶电泳对扩增产物检测，若特异性引物扩增片段长度为268bp，则制备焦磷酸测序单链模板进行焦磷酸测序反应，最后根据扩增结果和焦磷酸测序结果判定是否含有新城疫病毒强毒株或弱毒株；本发明吸收了RT-PCR和DNA测序技术优势，用特异序列测定满足对分子诊断需要，使新城疫强毒株或弱毒株的鉴定结果可靠，方法快捷，测试准确。 | ||
| 搜索关键词： | 磷酸 技术 鉴别 新城 疫病 毒强毒株 弱毒株 方法 | ||
【主权项】：
一种焦磷酸测序技术鉴别新城疫病毒强毒株与弱毒株的方法，其特征在于先进行引物设计，设计区分新城疫病毒强毒株与弱毒株的特异性引物及焦磷酸测序引物；再提取待测样品的核糖核酸或称RNA，然后用特异性引物进行逆转录 聚合酶链式反应或称RT PCR扩增，再进行琼脂糖凝胶电泳对扩增产物检测，若特异性引物扩增片段长度为268bp，则制备焦磷酸测序单链模板，进行焦磷酸测序反应，最后根据RT PCR扩增结果和焦磷酸测序结果判定样品中是否含有新城疫病毒强毒株或弱毒株。
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