[发明专利]五味子单体成分的分离制备方法

摘要

本发明涉及一种五味子单体成分的分离制备方法；将五味子乙醇提取物用石油醚萃取，将石油醚萃取物采用硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯洗脱，HPLC监测，收集洗脱流分粗提物A，粗提物B；洗脱剂石油醚-乙酸乙酯体积比为3～5∶1；粗提物A和粗提物B分别应用高速逆流色谱进行分离，得到五味子酚、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙和五味子酯乙单体，纯度均高于98％。

主权项

一种五味子单体成分的分离制备方法，其特征是：(1)将五味子药材粉碎用质量浓度70～95％乙醇回流提取3次，每次1.5小时，减压浓缩，得提取物浓缩液；(2)用石油醚萃取提取物浓缩液，将石油醚萃取物采用硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯洗脱，HPLC监测，共收集洗脱流分40瓶，每瓶1000毫升，前9瓶合并为粗提物A，后31瓶合并为粗提物B；洗脱剂石油醚-乙酸乙酯体积比为3～5∶1。(3)将两部分样品粗提物A和粗提物B分别应用高速逆流色谱进行分离，将由正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水组成的溶剂系统配置于分液漏斗中充分振摇后静置12小时，分层，上相作为固定相，下相作为流动相；分离粗提物A所用溶剂系统正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水体积比为(10-20∶1∶10-20∶1.2)；分离粗提物B所用溶剂系统正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水体积比为(1-2∶1.6∶1-2∶1.6)；首先使进样阀处于进样状态，将固定相用泵以一定流速灌满半制备型逆流色谱仪的色谱分离柱，开启速度控制器，使半制备型逆流色谱仪的色谱分离柱正转，转速达800r/min时，称取一定量样品放入固定相溶解，用注射器注入逆流色谱仪进样阀的储液管中，旋转进样阀为接柱状态，设置流动相流速为2.0mL/min，开始泵流动相；根据检测器紫外光谱图，对分离的每个色谱峰的对应物都进行收集，高效液相色谱检测，合并相同成分，得到纯度大于98％的五味子酚、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙和五味子酯乙单体。