[发明专利]重组牙鲆白细胞介素6蛋白及制备方法无效
申请号: | 200910249065.9 | 申请日: | 2009-12-31 |
公开(公告)号: | CN101805404A | 公开(公告)日: | 2010-08-18 |
发明(设计)人: | 王秀利;潘秋丽;袁野;刘洋;张峰;仇雪梅 | 申请(专利权)人: | 大连水产学院 |
主分类号: | C07K14/54 | 分类号: | C07K14/54;C12N15/24;C12N15/70 |
代理公司: | 大连非凡专利事务所 21220 | 代理人: | 闪红霞 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开一种重组白细胞介素6蛋白及制备方法,根据牙鲆白细胞介素6蛋白的DNA序列,设计引物对并以TRIzol Reagent法提取新鲜牙鲆肾脏总RNA并进行RT-PCR扩增,PCR产物与pMD19T载体连接得重组质粒,经双酶切后再与表达载体pET-32a(+)连接,获重组表达质粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中;通过IPTG诱导实现了重组蛋白的可溶性表达。因在表达过程中不产生包涵体,该表达质粒表达的融合蛋白带有组氨酸标签,方便了样品的鉴定和纯化,避免了样品的变性和复性,不但操作简单,降低了制作成本,更主要的是蛋白结构不受破坏;重组蛋白纯度好、得率高且不易降解,适应于工业化生产,为进一步研究牙鲆白细胞介素6蛋白的功能奠定基础。 | ||
搜索关键词: | 重组 白细胞 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种重组牙鲆白细胞介素6蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4。
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