[发明专利]一种基于寡核苷酸修饰的纳米金检测三聚氰胺的方法

摘要

本发明公开了一种基于寡核苷酸修饰的纳米金检测三聚氰胺的方法，其步骤：1)将能与三聚氰胺特异性结合的寡核苷酸连接到纳米金表面形成捕获探针，纳米金为一定粒径、纳米金溶液、反应温度、反应时间，纳米金与寡核苷酸的一定浓度比，加入NaCl寡核苷酸对纳米金的修饰，反应过程中引入半胱氨酸或谷胱甘肽；2)向步骤1)的寡核苷酸修饰的纳米金探针溶液中加入待测溶液反应，待测溶液的一定反应浓度、反应温度、反应时间，加入NaCl以三聚氰胺与寡核苷酸的结合；3)将步骤2)的反应液进行冷却稀释，通过目视比色法或测定紫外可见吸收光谱对三聚氰胺的检测。本发明操作简便，利于推广，能够实现三聚氰胺的快速、灵敏、选择性检测。

主权项

一种基于寡核苷酸修饰的纳米金检测三聚氰胺的方法，其步骤是：1)将能与三聚氰胺特异性结合的寡核苷酸连接到纳米金表面形成捕获探针，所述的纳米金的粒径为10～20nm，纳米金溶液的反应浓度为1～100nM，反应温度为10～38℃，反应时间为50～60小时，所述的纳米金与寡核苷酸的浓度比为1∶50～1∶150，所述的含巯基的寡核苷酸修饰纳米金反应体系中，加入缓冲溶液，该缓冲溶液为PBS或Tris-乙酸，反应浓度为10～20mM，同时加入NaCl寡核苷酸对纳米金的修饰，反应浓度为0.1～1.0M，反应过程中引入1μM～1mM半胱氨酸或谷胱甘肽；2)为向步骤1)的寡核苷酸修饰的纳米金探针溶液中加入待测溶液进行反应，其中，所述的待测溶液的反应浓度为10-3～10-7M，反应温度为70～100℃，反应时间为3～7分钟，所用缓冲溶液为Tris或PBS，或胂酸盐缓冲溶液，反应浓度为1～100mM，同时加入NaCl以三聚氰胺与寡核苷酸的结合；3)为将步骤2)的反应液进行冷却稀释，通过目视比色法或测定紫外可见吸收光谱对三聚氰胺的检测。