[发明专利]一种丙型肝炎病毒及其表面抗原的试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种丙型肝炎病毒及其表面抗原的试剂盒及检测方法。包括抗丙型肝炎病毒包膜抗原E2的多克隆抗体，酶标孔板，生物素标记单链DNA适配子ZE18，辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素及其显色底物。将抗丙型肝炎病毒包膜抗原E2的多克隆抗体包被酶标孔板，加入丙型肝炎病毒或待检血清或血液样品以及对照样品，经洗涤六次，结合在板上的丙型肝炎病毒或包膜抗原E2再用生物素标记的适配子ZE18捕获，加辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，加入底物显色，显色终止后，在酶标仪的吸收波长上测其OD值。本试剂盒检测速度快，操作方便安全，省时效率高，有效地对丙型肝炎病毒进行检测。试剂盒价格低廉，检测灵敏度和精确度很高，应用前景广阔。

主权项

一种丙型肝炎病毒及其表面抗原的试剂盒，其特征在于：试剂盒包括：抗丙型肝炎病毒包膜抗原E2的多克隆抗体；酶标板；生物素标记核酸适配子ZE18；辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素及其显色底物3’，3’，5，5’‑四甲基联苯胺；所述的抗丙型肝炎病毒包膜抗原E2的多克隆抗体的制备：将丙型肝炎病毒包膜抗原E2的真核表达载体pcDNA3.1A‑E2，肌肉多点注射入家兔，每隔一周后注射一次，每次免疫注射200g质粒DNA，注射三次，用基因电导入仪在注射部位电极导入DNA，第三次注射后2周，再用丙型肝炎病毒包膜抗原E2重组蛋白加强免疫，免疫注射2次，每次免疫注射100μg蛋白，两周后心脏取血，1000rpm离心分离血清，为丙型肝炎病毒包膜抗原E2的多克隆抗体，保存于‑80℃；所述的生物素标记核酸适配子ZE18：将ZE18序列合成，合成生物素标记ZE18的5’端为：bio‑ZE18，用无菌双蒸水稀释为400nM的浓度，‑20℃保存。