[发明专利]一种籼稻组织培养基及农杆菌介导的转基因方法

摘要

本发明公开了一种籼稻组织培养基及农杆菌介导的转基因方法，该培养基包含水稻愈组织生长所必须的大量元素，小量元素，有机元素以及不同培养阶段的激素配比。基于该培养基的籼稻转基因包括：愈伤组织的诱导，继代，预培养，共培养，筛选，后筛选，分化，生根等步骤。本方法广泛适用籼稻基因型，所测试的35个籼稻基因型遗传转化全部获得成功，转化率介于20-50％。解决了长期以来籼稻组织培养和农杆菌介导的遗传转化的技术难题：基因型依赖和转化频率低，将广泛应用于籼稻的分子生物学、功能基因组研究和品种遗传改良。籼稻种植的面积占水稻生产总面积的80％以上，本发明对水稻基础生物学研究、新品种改良，以及保障未来粮食安全发挥重要的作用。

主权项

一种籼稻愈伤组织培养的培养基，其组成物质和浓度范围如下：物质 浓度硝酸根离子 40-70mM铵离子 10-30mM钾离子 30-60mM磷酸根离子 2-5mM七水硫酸镁 150-400mg/l二水氯化钙 150-400mg/L硫酸锰 20-40mg/L硫酸锌 2-10mg/L硼酸 5-15mg/L碘化钾 1-5mg/L五水硫酸铜 0.01-0.1mg/L二水钼酸钠 0.1-1mg/L六水氯化钴 0.01-0.1mg/L甘氨酸 2-4mg/L维生素B1 1-2mg/L维生素B6 0.5-1mg/L烟酸 0.5-1mg/L肌醇 0-100mg/L七水硫酸亚铁 20-50mg/LNa2EDTA 30-70mg/L。