[发明专利]三尖杉植株再生及快速繁殖方法

摘要

本发明提供一种三尖杉离体胚培养及植株再生方法，属于三尖杉的培养技术。解决现有技术中三尖杉种子休眠时间长、苗时间长、出苗率低，因此很难获得理想的发芽率和更多的健壮苗的问题，本发明选取当年萌发饱满新芽的茎段为材料，经过诱导培养，15～20天即可萌发出生长健壮的新芽；再经过25～30天的增殖，20～25天诱导生根后即可成苗、移栽，成活率高达95％以上；扩繁系数较高，苗木成活后生长健壮，长势良好。

主权项

1.一种三尖杉植株再生及快速繁殖方法，其特征在于：所述方法的具体步骤包括：1)取材方法：选取当年萌发饱满新芽的茎段，在距离芽点1～2厘米处剪取，去除多余的叶片，采摘后用湿布包好。2)培养基的配制：在基本培养基为MS中分别添加生长激素：IBA、NAA、IAA、玉米素ZE或KT中的几种，分别配置成芽诱导培养基、芽增殖培养基和生根培养基，所述这些培养基中还加入Su为30g/L，Ag+为7.5g/L，PH值为5.8，附加物为活性炭Ac；所述这些培养基的厚度为1.4～1.6cm。3)材料消毒处理：先对材料进行适当的修剪，用洗涤剂漂洗干净，再将材料用自来水冲洗30分钟，把水沥干后置于超级工作台内，以重量浓度为75％的酒精消毒，摇荡，3～5秒钟后倒去酒精，加入0.1％升汞HgCl2处理8～13分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲3～4遍后，用消毒滤纸吸干表面水分，然后进行接种；4)诱导培养：取生长饱满的新芽切成0.8～1.5cm的小段，分别接种于经高温、高压灭菌的所述芽诱导培养基中；100～150g的芽诱导培养基接种3个胚；所述诱导培养的培养条件：：培养室温度为25±2℃，光照时间12h/d，光照强度1000～1500Lx；诱导培养的时间15～20天；5)增殖培养：将所述经过步骤4)的诱导培养生长良好的丛生芽切开，分别接种在增殖培养基中；100～150g的增殖培养基接种3个胚；所述增殖培养的培养条件：：培养室温度为25±2℃，光照时间12h/d，光照强度1000～1500Lx；增殖培养的时间25～30天；6)诱导生根：将步骤5)增殖培养出来的幼苗单株切下，带有2～3片叶子，株高1～2cm，转移到所述生根培养基中；100～150g的生根培养基接种3个胚；所述生根培养的培养条件：：培养室温度为25±2℃，光照时间12h/d，光照强度1000～1500Lx；生根培养的时间20～25天；7)试管苗完成：当试管苗长至3cm，3～5条根， 5片叶子，长度2～3cm时，完成三尖杉植株再生及快速繁殖试管苗培养。