[发明专利]一种从灵芝发酵液中制备三萜类物质赤芝酮C的方法

摘要

本发明公开了一种从灵芝发酵液中制备三萜类物质赤芝酮C的方法，通过在灵芝发酵液中补加蜣螂的乙醚提取物150-400mg/L来促进赤芝酮C的形成，并进一步探索出灵芝发酵液中赤芝酮C的提取、分离和纯化技术，形成了一种能在灵芝发酵液中制备单一化合物赤芝酮C的简单、低成本的方法。本发明的发酵工艺简单、发酵时间较短，且原料来源不受时间、季节等限制，可实现规模化生产。

主权项

1.一种从灵芝发酵液中制备三萜类物质赤芝酮C的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)蜣螂乙醚提取物的制备：取蜣螂的腹部部分烘干、粉碎，用乙醚-乙酸乙酯混合溶液提取，滤液经旋转蒸发后获得蜣螂乙醚提取物；2)灵芝液体培养：采用中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏的灵芝菌种，保藏号为CCGMC 5.616，将灵芝菌种接种于培养瓶中，在温度为26-30℃、转速为130-180r/min条件下回转式发酵25-80h；补加蜣螂乙醚提取物150-400mg/L后，在温度为25-30℃、转速为100-180r/min条件下回转式发酵72-144h结束；3)赤芝酮C的提取：将发酵液离心后浓缩，加入工业酒精除去多糖和蛋白质，取上清液旋转蒸去水后，用正丁醇回流提取，挥去正丁醇后再用氯仿提取，挥去氯仿后获得赤芝酮C的粗提物；4)赤芝酮C的分离和纯化：粗提物用甲醇溶解，先用大孔树脂柱分离，然后用硅胶柱分离，先后两次用碳18柱梯度洗脱，收集50％甲醇溶液的洗脱组份，挥去溶剂后用氯仿溶解，过滤去渣，滤液挥去氯仿后得白色赤芝酮C产品。