[发明专利]制备L-塔格糖的方法

摘要

本发明涉及生物技术领域的制备L-塔格糖的方法。制备L-塔格糖的方法，包括如下步骤：制备培养基；培养产酸细菌，得一级种子液；得二级种子液；将二级种子液接种到发酵培养基中，得到发酵液；得到酵母一级种子液和二级酵母种子液，离心，得酵母细胞；将酵母细胞培养，得澄清的发酵液；浓缩，脱色，过滤，得溶液；将溶液过离子交换树脂，结晶，洗涤，干燥，得L-塔格糖；利用静息细胞转化D-卫矛醇制备L-塔格糖的方法，包括如下步骤：制备培养基，培养细菌；悬浮菌体细胞，得溶液；接种假丝酵母(Candida ssp.)CGMCC NO：3268，得发酵液；将发酵液经过脱色和脱盐处理，得到水溶液，浓缩，结晶，洗涤，干燥，得L-塔格糖。本发明的方法可用来制备医药级L-塔格糖。

主权项

一种制备L-塔格糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，制备培养产酸细菌的培养基，培养基的成分为：1L培养基由以下组分组成：D-卫矛醇2～20克，多元醇1～10克，葡萄糖5～50克，酵母粉10克，无水硫酸镁0.5克，碳酸钙10克，余量为水；步骤二，将产酸细菌接种在步骤一所得培养基上，25～35℃振荡培养，得一级种子液；步骤三，将一级种子液接种到步骤一所得培养基中，25～35℃振荡培养，得二级种子液；步骤四，将二级种子液按照体积比为5～20％的接种量接种到发酵培养基中，培养，离心，得到发酵液；所述发酵培养基的成分为，1L发酵培养基由以下组分组成：D-卫矛醇10～100克，多元醇1～10克，葡萄糖5～50克，酵母粉5～50克，硫酸镁0.5克，磷酸氢二钾2克，余量为水；步骤五，制备用来培养酵母的培养基，培养基成分为：1L培养基由以下组分组成：葡萄糖15克，酵母粉10克，无水硫酸镁0.5克，余量为水；步骤六，将酵母接种在步骤五所得培养基中，25～35℃振荡培养，得到酵母一级种子液；步骤七，将酵母一级种子液接种到步骤五所得培养基中，25～35℃振荡培养，得到二级酵母种子液，离心，得酵母细胞；步骤八，将酵母细胞接种到步骤四所得发酵液中，25～35℃振荡培养5～40小时，离心，得澄清的发酵液；步骤九，将步骤八所得发酵液浓缩至原体积的1/10，加入质量百分比为2％的粉末性活性炭，80℃下，100rpm条件下脱色120分钟，过直径为0.22～0.45微米的微孔滤膜，得溶液；步骤十，将步骤九所得溶液依次经过D001阳离子交换树脂和D201阴离子交换树脂，直至电导率≤20μs/cm，再浓缩到折光率为＞60％，加入2～8倍体积的无水乙醇，混匀，4～30℃下结晶20～30小时，离心，得晶体，加入2倍质量的体积百分比为95％的乙醇洗涤2～3次，干燥，即得L-塔格糖。