[发明专利]同源重组方法和克隆方法以及试剂盒有效
| 申请号： | 200980108826.7 | 申请日： | 2009-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN102007212A | 公开（公告）日： | 2011-04-06 |
| 发明（设计）人： | 矶部正治;黑泽信幸 | 申请（专利权）人： | 国立大学法人富山大学 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12R1/19 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 吴娟;郭文洁 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | 本发明提供可以选择性地同源重组目标基因的方法、以及利用该方法得到的重组DNA分子。同源重组方法，该方法使用PCR产物和线性化载体，所述PCR产物包含两末端具有扩增用引物序列P1和P2的靶基因序列；所述线性化载体具有包含与该PCR产物的扩增用引物序列P1和P2同源的核苷酸序列的同源重组区VP1和VP2，在VP1的末端侧具有包含与P1内侧的部分序列T1同源的核苷酸序列的同源重组区VT1、和/或在VP2的末端侧具有包含与P2内侧的部分序列T2同源的核苷酸序列的同源重组区VT2(T1和T2的至少一方具有靶基因所特有的核苷酸序列)，该方法包括：使上述PCR产物参与同源重组反应，以将其插入上述载体中，由此得到在载体中特异性地插入有目标PCR产物的重组DNA分子。克隆方法，该方法利用上述同源重组方法，制备在载体中特异性地插入有目标PCR产物的重组DNA分子，之后扩增所得的重组DNA分子。 | ||
| 搜索关键词： | 同源 重组 方法 克隆 以及 试剂盒 | ||
【主权项】：
同源重组方法，该方法使用PCR产物和线性化载体，所述PCR产物包含两末端具有扩增用引物序列P1和P2的靶基因序列；所述线性化载体具有包含与该PCR产物的扩增用引物序列P1和P2同源的核苷酸序列的同源重组区VP1和VP2，并且，在VP1的末端侧具有包含与P1内侧的部分序列T1同源的核苷酸序列的同源重组区VT1、和/或在VP2的末端侧具有包含与P2内侧的部分序列T2同源的核苷酸序列的同源重组区VT2，其中T1和T2的至少一方具有靶基因所特有的核苷酸序列，该方法包括：使上述PCR产物参与同源重组反应，以将其插入上述载体中，由此得到在载体中特异性地插入有目标PCR产物的重组DNA分子。
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