[发明专利]经修饰的RNAi多核苷酸及其用途

摘要

本发明涉及改进的RNAi构建体及其用途。所述构建体具有19-49个核苷酸的双链区域，优选25、26或27个核苷酸，优选是平末端的。所述构建体具有选择性最小修饰，以赋予生物活性、毒性、稳定性和靶基因特异性的最佳平衡。例如，可修饰有义链(例如有义链的一端或两端被四个2′-O-甲基修饰)，使得所述构建体不被Dicer或其他RNA酶III切割，并且全长反义链被载入RISC中。另外，所述反义链也可在5′端第二个核苷酸处被2′-O-甲基修饰，以大大降低脱靶沉默。本发明的构建体在很大程度上避免了在哺乳动物细胞中的干扰素应答和序列非依赖性凋亡，显示出更好的血清稳定性和提高的靶标特异性。

主权项

用于抑制靶基因表达的长度为12至49个核苷酸的双链RNA(dsRNA)构建体，所述dsRNA包含：(1)具有5′端和3′端的有义链，其中所述有义链的所述5′和3′端各有一个或多个核苷酸具有2′修饰的核糖，和，(2)具有5′端和3′端的反义链，其与所述有义链杂交并与所述靶基因的mRNA杂交，其中所述反义链在从该反义链5′端起的第二个核苷酸处包含2′修饰的核糖，其中(a)所述dsRNA对Dicer的切割有抗性，(b)所述反义链与RISC结合，并且(c)所述dsRNA以序列依赖性方式抑制靶基因的表达。