[发明专利]校对引物延伸有效
申请号: | 200980131224.3 | 申请日: | 2009-08-08 |
公开(公告)号: | CN102119226A | 公开(公告)日: | 2011-07-06 |
发明(设计)人: | E·菲斯;T·W·迈尔斯 | 申请(专利权)人: | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李波;郭文洁 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | 本发明提供引物延伸反应,其包括聚合酶链式反应,其中具有3'-5'核酸外切酶活性的聚合酶编辑不完全互补的引物,从而允许扩增和检测在序列中可具有变异性的靶核酸。 | ||
搜索关键词: | 校对 引物 延伸 | ||
【主权项】:
一种进行引物延伸反应的方法,所述方法包括:a. 将寡核苷酸与(i)模板核酸和(ii)具有3'‑5'核酸外切酶活性的核酸聚合酶接触,其中: i. 所述寡核苷酸包括不被所述3'‑5'核酸外切酶活性去除的修饰的核苷酸; ii. 所述修饰的核苷酸不位于所述寡核苷酸的3'或5'末端核苷酸,也不位于所述寡核苷酸的3'倒数第二个核苷酸; iii. 所述寡核苷酸具有3'部分和5'部分,其中所述3'部分包括在所述寡核苷酸中的核苷酸,其是所述修饰的核苷酸的3';所述5'部分包括在所述寡核苷酸中的核苷酸,其是所述修饰的核苷酸的5';和 iv. 如果所述寡核苷酸的3'部分不与所述模板核酸100%互补,则接触步骤是在适于允许聚合酶以模板特异性方式编辑所述寡核苷酸3'部分的条件下进行;和 b. 以模板依赖性方式通过延伸所述寡核苷酸来进行引物延伸反应。
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