[发明专利]水解酶、编码它们的核酸及制备和使用它们的方法

摘要

提供了水解酶，包括脂肪酶、饱和酶、棕榈酸酶和/或硬脂酸酶，以及编码这些酶的多核苷酸，以及制备和使用这些多核苷酸和多肽的方法。进一步提供了具有水解酶活性的多肽，例如酶，诸如脂肪酶、饱和酶、棕榈酸酶和/或硬脂酸酶；以及制备低饱和度或低反式脂肪油的方法，例如低饱和度或低反式脂肪动物或植物油，例如，大豆或菜籽油。

主权项

一种水解油或脂肪的方法，包括以下步骤：(a)获得一种包含油或脂肪的组合物，其中该油或脂肪能够被具有水解酶活性的多肽水解，所述多肽选自具有水解酶活性的分离的、合成的和重组的多肽，且所述多肽i.由下述核酸编码(1)一种核酸，其包含与SEQ ID NO：1具有至少50％序列同一性的核酸序列，且其中1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12或更多、或全部碱基残基发生改变，如表3或表4所示，其中该核酸编码至少一种具有水解酶活性的多肽，或者(2)一种核酸，其包含在严格条件下与包含SEQ ID NO：1且具有如表3或表4所示的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12或更多或全部碱基残基变化的核酸序列杂交的序列，其中该核酸编码具有水解酶活性的多肽；或ii.在至少约100个残基的区域内与SEQ ID NO：2具有至少50％的序列同一性，且其中1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12或更多或全部氨基酸残基发生改变，如表3或表4所示，或iii.包含如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列，并且包含至少一种下列氨基酸残基修饰：D61A；D61E；R72E；R72K；E116A；E116Q；E116R；E116T；E116V；S133A；I151G；I151A；V163R；D164R，或其组合，或iv.包含如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列，并且包含至少一种下列氨基酸残基修饰：I20L；V62S；G77P；V83C；D88H；Y113G；E116T；E116G；H140K；K146S；I167S；L180E；E194M；A211Q；S212Y；G215C；G215V；G215W；A218H；A218S；V223A；A225M；A225Q，或其组合；(b)在足以造成所述油或脂肪水解的条件下，在包含所述油或脂肪的组合物中添加足够量的步骤(a)的多肽，从而水解该油或脂肪。