[发明专利]病毒纯化方法有效
| 申请号： | 200980146845.9 | 申请日： | 2009-09-24 |
| 公开（公告）号： | CN102215865A | 公开（公告）日： | 2011-10-12 |
| 发明（设计）人： | M·汤普森;J·威;A·纳格帕尔 | 申请（专利权）人： | 米迪缪尼有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/155 | 分类号： | A61K39/155;C12N7/02 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 韦东 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明提供从贴壁细胞(例如，MDCK细胞或非洲绿猴肾细胞株系细胞)纯化细胞相关病毒的方法。具体而言，本发明提供用于包含减毒活细胞相关病毒(例如，减毒的呼吸道合胞病毒(RSV)或冷适应和/或温度敏感性流感病毒)的免疫原性组合物生产的纯化方法，其引起宿主细胞DNA(HCD)、宿主细胞蛋白质(HCP)和非特异性内切核酸酶(例如Benzonase)的水平低于管理机构要求的规格。所述免疫原性组合物可用于主动免疫接种对象或产生用于各种应用包括被动免疫接种和诊断免疫鉴定的抗体。 | ||
| 搜索关键词： | 病毒 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种从病毒感染细胞纯化呼吸道合胞病毒的方法，其特征在于，所述方法包括：a)澄清病毒收获物以形成澄清的病毒收获物，其中澄清包括：i.采用孔径在约3微米到约10微米之间的至少一个澄清过滤器通过直流过滤(DFF)过滤病毒收获物；ii.用非特异性内切核酸酶处理病毒收获物；iii.采用孔径在约0.45微米到约3微米之间的至少一个澄清过滤器通过DFF过滤病毒收获物；b)用包含蔗糖、磷酸盐或含盐(NaCl或KCl)Tris的稳定缓冲液稳定澄清的病毒收获物，以形成稳定的病毒收获物；c.采用分子量截留值(MWCO)为500kDa‑0.1μm的中空纤维筒通过切向流过滤(TFF)浓缩稳定的病毒收获物并通过渗滤(DF)进行缓冲液交换，以形成浓缩的病毒收获物；d)采用孔径在约0.8微米到约0.45微米之间的至少一个澄清过滤器通过DFF过滤浓缩的病毒收获物；其中呼吸道合胞病毒从病毒感染细胞纯化，其最终病毒感染性效价为至少5.7log10FFU/mL。
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