[发明专利]一种拟青霉代谢产物及其应用无效
申请号: | 201010039109.8 | 申请日: | 2010-01-05 |
公开(公告)号: | CN101787376A | 公开(公告)日: | 2010-07-28 |
发明(设计)人: | 刘亚君;张克勤;刘意 | 申请(专利权)人: | 云南大学 |
主分类号: | C12P1/02 | 分类号: | C12P1/02;A01N63/04;A01P5/00;C12R1/79 |
代理公司: | 昆明今威专利代理有限公司 53115 | 代理人: | 杨宏珍 |
地址: | 650091*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明涉及一种拟青霉代谢产物及其应用,属于微生物药物筛选技术领域。本发明是这样实现的:生产菌株为Paecilomyces sp.1788,保藏号:CGMCCNo.3422;将拟青霉(Paecilomyces sp.1788)通过查氏培养基常规液体发酵培养,将发酵液低压浓缩后,水相经反复柱层析,洗脱得到本发明的拟青霉代谢产物。本发明的拟青霉代谢产物具有毒杀松材线虫(Bursaphelenchuh xylophilus)的功能,24小时的半致死率(ED50)为299.5ppm,ED95为796.2ppm。能作为制备杀松材线虫制剂的应用。本发明与现有的杀松材线虫药相比,具有高效、低毒、易溶于水、易制备等特点。 | ||
搜索关键词: | 一种 青霉 代谢 产物 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种拟青霉代谢产物,其特征在于该拟青霉代谢产物由如下步骤得到:a.生产菌株为Paecilomyces sp.1788,保藏号:CGMCC No.3422;b.将1788菌株的菌丝体接种到试管PDA固体培养基斜面上,20-30℃下培养4-8天,获得试管种;c.将试管种接种到每瓶装50ml液体培养基的250ml三角瓶中,培养基配方为:蛋白胨10g,酵母膏10g,葡萄糖20g,自来水1000ml,pH自然;培养温度20-30℃;摇床培养,转速为100-250 rpm;培养时间5-15天;d.将含菌丝的发酵液低压浓缩后,用乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,萃取后的水相部位低压浓缩形成浓缩液,将其缓慢加入2倍体积的丙酮中并不断搅拌,然后静置,形成丙酮水溶相和沉淀相,再分离两相;e.重复数次直至丙酮水溶相基本无色,收集沉淀相;沉淀相重复过聚己酰胺柱,以丙酮与水梯度洗脱,再经过C-18硅胶柱和SephadexLH-20凝胶柱甲醇洗脱,以TLC板为参考合并组分,活性跟踪检测所分离得到活性组分,用0.5%茚三酮乙醇溶液显色成红色。
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