[发明专利]一种在有机玻璃上固定蛋白质分子的方法

摘要

本发明公开了一种在有机玻璃上固定蛋白质分子的方法。是用丙酮和铬酸液处理后的有机玻璃作为固定蛋白质分子的载体，然后才用于固定蛋白质分子。具体制作步骤是：1)有机玻璃的预处理，2)有机玻璃的处理，3)蛋白质分子的固定和4)蛋白质分子活性判断。本发明为蛋白质芯片的制备提供了新的可塑性强、处理简便、来源容易、经济的载体材料。

主权项

一种在有机玻璃上固定蛋白质分子的方法，其特征在于，是用丙酮和铬酸液处理后的有机玻璃作为固定蛋白质分子的载体，然后才用于固定蛋白质分子，具体制作步骤如下：1)有机玻璃的预处理将有机玻片切裁至玻璃载玻片大小，先用市售洗洁精清洗，然后浸泡入5g/L碳酸钠、25g/L碳酸氢钠混合溶液清洗，蒸馏水洗干净后置于50℃烘箱内烘干；2)有机玻璃的处理(1)烘干后的有机玻璃基片置于丙酮液浸泡作用5秒至15分钟；(2)用1～5g重铬酸钾加2～20ml蒸馏水，加热溶解，取18～180ml重量百分浓度为98％的浓硫酸，将硫酸缓缓加入，并搅拌配制成新铬酸液，盛于玻璃器皿中，将经步骤(1)处理后的有机玻璃基片在铬酸液中浸泡0.5～10小时取出，用蒸馏水洗3次，室温干燥；3)蛋白质分子的固定(1)用加样器将蛋白质分子在处理好的有机玻璃基片上点样，4℃放置0.5～12小时；(2)第二天用pH7.4磷酸缓冲液清洗基片3次，滤纸吸干表面水分；(3)滴加封闭液，如用pH7.4磷酸缓冲液配制10％的脱脂奶粉液，封闭1小时；用pH7.4的磷酸缓冲液加0.2％的吐温液清洗3次，最后用pH7.4的磷酸缓冲液清洗1次，滤纸吸干表面水分；4)蛋白质分子活性判断滴加反应底物进行分子反应，用显色剂或检测仪器分析蛋白质分子与底物的反应性质或状态，从而作出检验检测判断。