[发明专利]一种能用于构建cDNA文库筛选的质粒载体的方法无效
| 申请号： | 201010116982.2 | 申请日： | 2010-03-03 |
| 公开（公告）号： | CN101775441A | 公开（公告）日： | 2010-07-14 |
| 发明（设计）人： | 彭迎春;佘玮 | 申请（专利权）人： | 彭迎春 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/63;C12N1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 410000湖南省浏阳*** | 国省代码： | 湖南;43 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种能用于构建cDNA文库构建筛选的质粒载体的方法，该方法制备的载体包含单酶切而产生两个不同粘末端的酶切位点Sfi I，即可用于全长cDNA的定向克隆、文库构建和测序；同时插入基因与GAL4的激活域融合，是一个酵母表达载体，可作为酵母双杂交的筛选文库。本发明获得一个既可用于全长cDNA的定向克隆、文库构建、测序又能用于酵母双杂交的筛选文库的质粒pGADT7M。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 构建 cdna 文库 筛选 质粒 载体 方法 | ||
【主权项】：
一种能用于构建cDNA文库构建筛选的质粒载体的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：(1)、将空载体pDNR-LIB的一个单克隆质粒，用NdeI和XhoI双酶切后，回收短片段；(2)、将质粒pGADT7也用NdeI和XhoI双酶切后回收大片段；(3)、这两个片段通过T4DNA连接酶连接、转化和测序鉴定，这个质粒载体就改造成了酵母双杂交文库的载体，为pGADT7M，这个载体上就含有两个SfiI酶切位点，以pGADT7为基础改造的，具备pGADT7所具备的用于细菌中复制、酵母中复制和表达，和酵母双杂交等所具备的元件：pUC ori，Ampr，2μ ori，LEU2，GAL4AD，PADH1，TADH1，SV40 NLS，HA Tag。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于彭迎春，未经彭迎春许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201010116982.2/，转载请声明来源钻瓜专利网。
