[发明专利]电磁辐射致癌的Scid小鼠模型及构建方法

摘要

本发明涉及一种电磁辐射致癌的Scid小鼠模型及构建方法。该方法首先培养NIH/3T3细胞并传代，然后将细胞暴露于30～90W/m2的电磁辐射下，培养4～6周，再进行软琼脂糖培养实验，并接种于Scid小鼠进行致瘤实验。结果表明软琼脂糖实验中有细胞集落形成，致瘤实验中Scid小鼠均产生肿瘤。本发明方法建立了电磁辐射诱发肿瘤的Scid小鼠模型，效果显著、步骤简单、重复性好。本发明方法建立的体外细胞转化实验模型可用于模拟体内细胞的恶性转化，为电磁辐射诱发肿瘤的发病机制及防治措施的研究提供了一种良好的实验模型和有力的技术手段。本发明方法可以应用于工业、科学、医疗以及日常生活中电磁辐射的致癌性风险预评价，对预防电磁辐射对人体健康的远期危害具有重要价值。

主权项

一种电磁辐射致癌的Scid小鼠模型及构建方法，包括以下步骤：(1)NIH/3T3细胞的培养与传代将NIH/3T3细胞在37℃、5％CO2培养箱内用DMEM培养液培养，培养液中含有10％小牛血清、1％青霉素、1％链霉素和1％谷氨酰胺，当细胞生长增殖形成单层细胞并扩展汇合后，吸出旧培养液，加入0.03％Versene溶液冲洗一遍，吸出洗液，然后加入胰蛋白酶消化液37℃进行消化，消化结束后再进行传代；(2)暴露实验将NIH/3T3细胞在细胞培养板上用DMEM培养液培养，将装有NIH/3T3细胞的培养板置于横电磁波传输小室中，再将该小室置于5％CO2培养箱中，同时，将NIH/3T3细胞暴露于功率密度为30～90W/m2的电磁辐射下，设定培养箱温度为36.5℃，每天辐射2小时，培养4～6周；(3)软琼脂培养实验配制浓度分别为1.2％和0.6％的琼脂糖溶液，以及2×DMEM培养液，培养液中含有20％小牛血清、2％青霉素、2％链霉素和2％谷氨酰胺，向一支试管中加入2×DMEM培养液和1.2％琼脂糖溶液各1mL，倒入细胞培养板中，待凝固后制成琼脂糖基础层，再向另一支试管中加入2×DMEM培养液和0.6％琼脂糖溶液各0.5mL，然后接种0.2mL NIH/3T3细胞溶液，均匀混合后加在基础层上，待凝固后制成双层琼脂，将细胞培养板置于37℃、5％CO2培养箱中培养2周；(4)Scid小鼠致瘤实验收集经过电磁辐射的NIH/3T3细胞，对2只Scid小鼠进行背部皮下接种，每只小鼠注射细胞悬液0.1mL，饲养6周后对形成的瘤块进行病理切片检查。