[发明专利]一种滇紫草植株再生的方法

摘要

本发明涉及一种通过愈伤组织再生滇紫草植株的方法。其操作步骤主要包括：1)滇紫草胚性愈伤组织的诱导；2)胚性愈伤组织的继代培养；3)胚性愈伤组织丛生芽的分化；4)丛生芽的扶壮和根的诱导；5)炼苗和移栽。本发明能够获得高繁殖系数的胚性愈伤组织，获得的滇紫草再生植株成活率高，生长状态良好，可应用到大规模培育滇紫草人工植株的实际生产过程中。

主权项

一种通过愈伤组织再生滇紫草植株的方法，其特征在于该方法的操作步骤包括：1)滇紫草胚性愈伤组织的诱导：把经过消毒的滇紫草叶片移至愈伤组织诱导培养基上，诱导培养基和培养条件为：MS基础培养基+NAA 0.1-0.3mg/L+2，4-D 0.8-1.5mg/L，固体琼脂培养，pH值5.6，温度25℃，避光培养；2)胚性愈伤组织的继代：步骤1)中诱导出的胚性愈伤组织，进行继代2次，继代培养基和培养条件为：MS基础培养基+KT 1.0mg/L+2，4-D 0.2mg/L，固体琼脂培养，pH值5.6，温度25℃，避光培养；3)胚性愈伤组织丛生芽的分化：从继代培养基中取出胚性愈伤组织接种到分化培养基中，既可分化出丛生芽，丛生芽分化培养基和培养条件为：无蔗糖MS基础培养基+KT1.0-2.0mg/L+蔗糖30-50g/L，固体琼脂培养，pH值5.6，温度25℃，避光培养；4)丛生芽的扶壮和根的诱导发生：待步骤3)中的丛生芽长至1cm左右，将其从基部切下，进行丛生芽的扶壮培养，丛生芽扶壮培养基和培养条件为：无蔗糖MS基础培养基+KT 2.0mg/L+蔗糖30g/L，固体琼脂培养，pH值5.6，温度25℃，光照培养，光强5000Lux；5)经过扶壮的丛生芽长至4cm左右的无根苗时，将苗移至生根培养基中诱导生根，生根培养基和培养条件为：无蔗糖MS基础培养基+IBA 1.0-2.0mg/L+蔗糖10-20g/L，固体琼脂培养，pH值5.6，温度25℃，光照培养，光强5000Lux；6)炼苗和移栽：待步骤4)中的幼苗长出4条以上的根，且长度超过1.5cm，可进行炼苗，移至以蛭石和珍珠岩混合物为基质的培养穴中炼苗10天，待幼苗长出两片新叶后可进行移栽。