[发明专利]检测小管福寿螺体内广州管圆线虫的试剂盒及方法

摘要

本发明公开了一种检测小管福寿螺体内广州管圆线虫的试剂盒，该试剂盒中含有：(A)CTAB裂解液(2％CTAB，20m mol/L EDTA，0.1mol/L Tris-Cl，1.4mol/L NaCl)；(B)巯基乙醇；(C)蛋白酶K(20mg/mL)；(D)苯酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1)；(E)Tris-EDTA缓冲液(10m mol/L Tris-Cl，1m mol/L EDTA，pH8.0)；(F)2×Master PCR Mix；(G)引物(10μmol/L)。此外，本发明还公开了检测小管福寿螺体内广州管圆线虫的方法。本发明的试剂盒敏感性高、特异性强、重复性好，检测方法简单实用，为基层展开小管福寿螺分子学检测提供便利，同时为广州管圆线虫病暴发后食用螺的检测提供有效手段。

主权项

一种检测小管福寿螺体内广州管圆线虫的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中含有：(A)CTAB裂解液，该CTAB裂解液含有2％CTAB，20mmol/L EDTA，0.1mol/L Tris-Cl和1.4mol/L NaCl；(B)巯基乙醇；(C)20mg/mL的蛋白酶K；(D)苯酚、氯仿和异戊醇的混合液，苯酚∶氯仿∶异戊醇为25∶24∶1；(E)Tris-EDTA缓冲液，该缓冲液含10m mol/LTris-Cl和1mmol/L EDTA，pH为8.0；(F)2×Master PCR Mix；(G)10μmol/L的引物，所述引物含有引物1和引物2，该引物1的序列为：上游：5’-CGC CTG TTT AAC AAA AAC AT-3’(SEQ ID NO：1所示序列)，下游：5’-CCG GTC TGA ACT CAG ATC ATG T-3’(SEQ ID NO：2所示序列)；该引物2的序列为：上游：5’-GCA AAT GCT TTC GCT TTA GG-3’(SEQ IDNO：3所示序列)，下游：5’-AAT GGC AGG GAC GTA ATC AG-3’(SEQ ID NO：4所示序列)。