[发明专利]用基因工程技术生产重组嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus halodurans XJU-1)乙醛脱氢酶的方法无效
| 申请号： | 201010138550.1 | 申请日： | 2010-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN101942465A | 公开（公告）日： | 2011-01-12 |
| 发明（设计）人： | 高秀峰;赵绪光;王国庆;李永生 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N15/70;C12N9/02;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 610065 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用基因工程技术生产重组嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus haloduransXJU-1)乙醛脱氢酶的方法，内容包括克隆嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus halodurans XJU-1)乙醛脱氢酶aldA和aldB基因片段；其基因片段分别与pET30b(+)表达载体重组，构建pET30b(+)-aldA和pET30b(+)-aldB重组载体；重组载体分别转化大肠杆菌BL21(DE3)后，经卡那霉素筛选，分别获得表达乙醛脱氢酶aldA和aldB的BL21(DE3)工程菌；表达乙醛脱氢酶的BL21(DE3)工程菌在LB培养基扩大培养，从发酵液提取、分离得到乙醛脱氢酶粗酶液。 | ||
| 搜索关键词： | 基因 工程技术 生产 重组 嗜碱耐盐 芽孢 杆菌 bacillus halodurans xju | ||
【主权项】：
一种利用基因工程技术生产重组嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus halodurans XJU‑1)乙醛脱氢酶的方法，其特征包括如下步骤：A.克隆嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus halodurans XJU‑1)乙醛脱氢酶aldA和aldB基因片段；B.嗜碱耐盐芽孢杆菌(Bacillus halodurans XJU‑1)乙醛脱氢酶aldA和aldB基因片段分别与pET30b(+)表达载体重组，构成pET30b(+)‑aldA和pET30b(+)‑aldB重组载体；C.pET30b(+)‑aldA和pET30b(+)‑aldB重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后，经卡那霉素筛选，获得表达乙醛脱氢酶的BL21(DE3)工程菌；D.表达乙醛脱氢酶的BL21(DE3)工程菌在LB培养基培养，经种子及发酵扩大培养，从发酵液提取、分离得到乙醛脱氢酶粗酶液。
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