[发明专利]牙鲆淋巴囊肿病基因工程疫苗及其生产方法

摘要

一种牙鲆淋巴囊肿病基因工程疫苗及其生产方法，其特征是该基因工程疫苗由大小为0.6kb的淋巴囊肿病毒核衣壳蛋白基因MCP片段，插入到真核表达载体pEGFP-N2中构成的重组质粒pEGFP-N2-LCDV-MCP 0.6kb。将其转化入大肠杆菌制备生产用菌种，划线到Mi nca琼脂平板、分离纯化、制备并确定合格的一级种子，再接种于琼脂扁瓶中，在37℃培养后24-48h后，对其鉴定确定合格的二级种子；再发酵培养得到发酵的二级种子培养菌液；进行菌体收集、离心、质粒DNA提取、纯化，进行常规检验合格者即得。本发明完整的生产工艺简便、稳定性好和成本低；比目前的灭活疫苗、减毒疫苗、多肽疫苗、亚单位疫苗和重组多肽疫苗等免疫效果好、安全无副作用。

主权项

一种牙鲆淋巴囊肿病基因工程疫苗，特征在于该疫苗由大小为0.6kb的淋巴囊肿病毒核衣壳蛋白基因MCP片段，插入到真核表达载体pEGFP‑N2中构成的重组质粒pEGFP‑N2‑LCDV‑MCP 0.6kb，插入到核酸疫苗中的淋巴囊肿病毒核衣壳蛋白基因MCP片段序列为：ATGATCGGTAATACTATTGATATGACACAACCCGTTGATTCCAATGGTCAATTACCTGAAGAAGTGTTAATACTTCCTTTACCTTATTTCTTTTCTCGAGATAGCGGTATGGCTTTACCCAGCGCTGCTTTGCCTTATAATGAAATAAGATTAACTTTTCATCTGAGAGATTGGACTGAATTATTGATCTTTCAAAATAAAAACGACTCTACCATCATGCCTTTGACAGCAGGCGATTTAGACTGGGGTAAACCTGATTTAAAGGATGTGCAAGTATGGATTACTAATGTAGTAGTAACCAATGAGGAACGTCGTTTAATGGGTACAGTACCTAGAGACATCTTGGTGGAACAGGTACAAACAGCACCTAAACATGTATTTCAACCTCTAACTATTCCAAGTCCTAATTTTGACATCAGATTTTCTCATGCCATTAAAATCCTTTTTTTCGGTGTGCGTAATGTTACCTATCAAGCTATACAATCCAATTACACCAGTTCTTCTCCTGTAATCTTTGACGGTGGAATTGCTAGCGATTTACCGGGTATTGCTGCTGATCCTATTTCAAATGTTACCTTGGTTTATGAAAATAGTGCTCGTCTTAATGAAATGGGTAGTGAATAT其中A为腺嘌呤脱氧核糖核苷酸，G为鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸，C为胞嘧啶脱氧核糖核苷酸，T为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸。