[发明专利]特异序列基础的水通道蛋白4高效价抗体的制备及应用无效
| 申请号： | 201010164851.1 | 申请日： | 2010-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN101830983A | 公开（公告）日： | 2010-09-15 |
| 发明（设计）人： | 李晓萌;张淑芝;汪小莞;关新刚;杨南扬;麻彤辉 | 申请（专利权）人： | 东北师范大学 |
| 主分类号： | C07K16/16 | 分类号： | C07K16/16;C12N15/62;C12N15/70;C07K19/00;G01N33/53 |
| 代理公司： | 长春市东师专利事务所 22202 | 代理人： | 刘延军;修雪静 |
| 地址： | 130024 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明属于生物工程技术领域，涉及特异序列基础的水通道蛋白4高效价抗体的制备及应用，利用基因工程技术，将小鼠AQP4基因近3′端亲水区克隆到原核表达载体中。经酶切和序列分析后，用重组质粒转化大肠杆菌，并经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导产生GST-AQP4融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫新西兰兔制备抗血清。抗血清的效价及特异性采用ELISA和Western blot检测。构建融合蛋白原核表达载体，可高效表达特异性的融合蛋白，获得抗GST-AQP4融合蛋白的高效价抗血清。该抗AQP4多克隆抗体效价与特异性均较良好，适合对AQP4的检测应用。为从蛋白水平深入研究AQP4功能提供了必要的实验工具。 | ||
| 搜索关键词： | 特异 序列 基础 通道 蛋白 高效 抗体 制备 应用 | ||
【主权项】：
特异序列基础的原核表达GST-AQP4融合蛋白的多克隆抗体，其特征在于利用特异序列原核表达的GST-AQP4融合蛋白作为抗原免疫动物产生抗血清而获得，该抗血清中抗GST-AQP4抗体的滴度高达1∶50000，并经过Western blot和免疫组化鉴定抗GST-AQP4血清具有较好的特异性，其中，所述的特异序列是指AQP4基因近3′端亲水区的一段序列，其氨基酸序列为：tkgsymev ednrsqvete dlilkpgvvh vididrgeek kgkd核苷酸序列为：781 tgtcctgatg tggagctcaa acgtcgcctt841aaggaagcct tcagcaaagc cgcgcagcag acaaaaggga gctacatgga ggtggaggac901aaccggagcc aagtggagac ggaagacttg atcctg
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