[发明专利]一种白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶的提取方法无效
| 申请号： | 201010166712.2 | 申请日： | 2010-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN102242104A | 公开（公告）日： | 2011-11-16 |
| 发明（设计）人： | 薛百忠;张妍;王宏英;薛雁;李小军;温丽丽;王寒 | 申请（专利权）人： | 辽宁诺康医药有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/64 | 分类号： | C12N9/64 |
| 代理公司： | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 | 代理人： | 张晨 |
| 地址： | 110000 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 一种从白眉蝮蛇蛇毒中提取具有止血作用的类凝血酶的方法，其具体步骤包括如下：蛇毒经浸泡溶解、离心；上清液经SP Sepharose Fast Flow阳离子交换层析；含有效成分的洗脱液经透析；透析样品再经M-Aminothenyltrotionic Acid-Agarose亲和层析，即可得到单一成分的类凝血酶。本方法可以在常温下进行操作，并具有工艺稳定、适合规模化生产、操作简单、生产周期短、产品纯度高等特点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蝮蛇 蛇毒 凝血酶 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶的提取方法，其特征在于：在常温下，从白眉蝮蛇蛇毒中提取单一成份类凝血酶的步骤为：(1)白眉蝮蛇蛇毒用缓冲液浸泡、溶解过夜，离心去除沉淀，得到蛇毒上清液；(2)蛇毒上清液经SP Sepharose Fast Flow阳离子交换层析，上样结束后，用pH6.0的PBS缓冲溶液I进行洗脱，紫外检测仪280nm检测，至读数达到基线后，再用pH6.0含0.2M NaCL的PBS缓冲溶液II直线洗脱，紫外检测仪280nm检测，收集活性峰，得到类凝血酶粗提液；(3)类凝血酶粗提液用pH8.0的PBS缓冲溶液III透析；(4)透析后的样品经M‑Aminothenyltrotionic Acid‑Agarose亲和层析，上样结束后，用pH8.0的PBS缓冲溶液III进行洗脱，紫外检测仪280nm检测，至读数达到基线后，再用梯度混合仪进行梯度洗脱，紫外检测仪280nm检测，收集挂柱峰，得到单一组分的类凝血酶；
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