[发明专利]一种菝葜皂苷元含量的ELISA测定方法无效
申请号: | 201010171825.1 | 申请日: | 2010-05-14 |
公开(公告)号: | CN101852801A | 公开(公告)日: | 2010-10-06 |
发明(设计)人: | 余伯阳;王晶;刘吉华 | 申请(专利权)人: | 中国药科大学 |
主分类号: | G01N33/566 | 分类号: | G01N33/566;G01N33/531 |
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地址: | 211198 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了检测菝葜皂苷元含量的酶联免疫分析方法,涉及菝葜皂苷元抗体的制备,酶联免疫分析方法的建立及其在含有菝葜皂苷元中药材或相关样品含量测定中的应用。本发明用与载体蛋白偶联的菝葜皂苷元作为完全抗原,获得针对抗菝葜皂苷元的抗体,并且用于药材及相关样品中菝葜皂苷元含量的测定。目的是提供一种新的菝葜皂苷元检测分析方法。本分析方法灵敏度高,样品前处理简单,测定过程简便,快速,适合于研究单位,检验部门,贸易大批量样品分析检测的需要。 | ||
搜索关键词: | 一种 皂苷 含量 elisa 测定 方法 | ||
【主权项】:
一种菝葜皂苷元含量的酶联免疫(ELISA)测定方法,其特征在于主要步骤如下:第一步、琥珀酸酐和菝葜皂苷元反应使菝葜皂苷元羧基化;第二步、采用活泼酯法将菝葜皂苷元琥珀酰衍生物与N,N′-二环己基碳酰亚胺,N-羟基丁二酰亚胺,在N,N-二甲基甲酰胺中搅拌反应2-8小时,最后与10-50mg载体蛋白搅拌反应4-48小时,生成免疫抗原;第三步、用免疫抗原免疫动物,获得抗菝葜皂苷元的多克隆抗体;第四步、检测抗体效价;第五步、建立间接竞争ELISA分析方法,用此方法检测中药材及相关样品中菝葜皂苷元的含量。
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