[发明专利]一种ABO血型基因分型的PCR-SBT方法及试剂有效
申请号: | 201010174588.4 | 申请日: | 2010-05-17 |
公开(公告)号: | CN101921834A | 公开(公告)日: | 2010-12-22 |
发明(设计)人: | 严力行;朱发明;许先国 | 申请(专利权)人: | 浙江省血液中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人: | 刘晓春 |
地址: | 310006 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供一种用于ABO血型分型的PCR-SBT方法,它包括下述步骤:制备人基因组DNA;扩增ABO基因外显子1、外显子2-4、外显子5-7的片段;得到扩增产物进行双酶切纯化;将纯化产物进行测序PCR反应;将测序产物进行醋酸钠-乙醇沉淀法纯化,进行毛细管电泳测序;将获得的序列通过软件分析,确定其基因型。本发明解决了ABO亚型的鉴定、疑难血型的判定、新突变位点的发现、基因之间的重组现象、基因多态性检测等问题,发挥PCR-SBT对ABO基因定型操作高通量,结果精确的特点,在临床输血医学研究和遗传学等领域的相关应用受到高度重视,对于医学研究单位、药学研究和试剂开发单位具有重要的现实意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 abo 血型 基因 pcr sbt 方法 试剂 | ||
【主权项】:
一种ABO血型基因分型的PCR SBT方法,其特征在于它包括以下步骤:(1)制备基因组DNA;(2)设计扩增引物,用聚合酶链反应分别扩增人基因组DNA中ABO基因外显子1、外显子2 4、外显子5 7的三个片段,其中1号外显子采用含GC缓冲液的PCR扩增;(3)将步骤(2)得到的扩增产物进行双酶切纯化;(4)设计测序引物,将步骤(3)得到的纯化产物进行测序PCR反应;(5)将步骤(4)得到的测序产物进行醋酸钠 乙醇沉淀法纯化,进行毛细管电泳测序;(6)将步骤(5)获得的序列通过软件分析,确定其基因型。
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