[发明专利]H5亚型禽流感病毒变异株的多重PCR检测方法

摘要

本发明涉及一种多重PCR检测H5亚型禽流感病毒变异株的方法。该方法是利用3对引物对相应靶基因进行RT-PCR扩增，PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，然后根据电泳结果进行判定：A型流感毒株出现300bp的型特异条带，H5亚型流感病毒出现173bp的亚型特异条带，变异株出现559bp的特异条带。为禽流感和变异株的快速诊断提供了新的方法，为疫苗的选择提供指导作用。

主权项

一种H5亚型禽流感病毒变异株的多重PCR检测方法，其特征是从待检禽的气管或泄殖腔试子或血液或器官组织或尿囊液中提取全基因组RNA，再以RNA为模板，以AIV基质蛋白(M)、血凝素(H5)基因为靶基因设计型特异性引物、亚型特异性引物和鉴定变异株的引物进行RT-PCR扩增，PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，然后根据电泳结果进行判定；M1     5′-ATTGGGACTCATCCTAACTCTA-3′M2     5′-CGTCAACATCCACAGCACTC-3′HA1    5′-ATRCCATTYCACAACATACACC-3′HA2    5′-TCCYTGCCATCCTCCCTC-3′HA3    5′-TAATACATACCCACCAATAAAGGTGA-3′HA2    5′-TCCYTGCCATCCTCCCTC-3′其中，R为A或G；Y为C或T。