[发明专利]一种生物转化制备新科斯糖的方法

摘要

一种生物转化制备新科斯糖的方法，属于生物工程技术领域。本发明以法夫酵母269为出发菌株，经摇瓶发酵制备种子培养基、菌体细胞的扩大培养，静息细胞的制备，全细胞的生物转化制备新科斯糖。该细胞产糖的较适工艺条件为：细胞浓度40-100g/L，蔗糖浓度200-600g/L，转化温度20-30℃，转化时间4-8h，所用细胞菌龄为32-48h。在此工艺条件下新科斯糖的转化率可达55％以上，转化糖液直接浓缩干燥即可达P55级。该工艺具有操作简单，转化率高，成本低等优点，因此具有较高的工业化生产潜力。

主权项

一种生物转化制备新科斯糖的方法，其特征在于包括如下步骤：种子培养、细胞增殖培养、静息细胞的制备、新科斯糖的法夫酵母全细胞生物转化工艺；(1)种子培养：出发菌株：法夫酵母269；种子培养基：蔗糖30g/L，蛋白胨5g/L，酵母膏3g/L；将法夫酵母269接种于种子培养基中，于18 24℃摇床180 250r/min振荡培养40 48h，制得种子液；(2)细胞增殖培养：发酵培养基：蔗糖30 60g/L，蛋白胨3 8g/L，酵母膏3 8g/L；将种子液接种于发酵培养基中，于18 24℃摇床180 250r/min、32 48h条件下大量生产法夫酵母细胞；(3)静息细胞的制备：通过离心法收集上述发酵所产法夫酵母细胞，用柠檬酸磷酸缓冲液洗涤两遍，然后悬浮于同样的缓冲液中得静息细胞；(4)新科斯糖的法夫酵母全细胞生物转化工艺：将静息细胞离心并收集湿菌体，即为法夫酵母全细胞，经称重后直接加入蔗糖溶液中转化制备新科斯糖，转化条件为：反应体系为蔗糖溶液，法夫酵母全细胞加入量40 100g/L，蔗糖浓度为：200 600g/L，反应温度：20 30℃，反应时间：4 8h，细胞菌龄：32 48h。