[发明专利]分子印记固相萃取-液相色谱测定体液中可天宁的方法

摘要

一种分子印记固相萃取-液相色谱测定体液中可天宁的方法，涉及体液中可天宁的测定方法。该方法依次包括以下步骤：(1)以可天宁为模板，合成可天宁分子印记聚合物；(2)将合成的聚合物作为固相萃取吸附剂，制备固相萃取小柱；(3)采用含有机酸、水的乙腈溶液、醇、缓冲溶液依次淋洗固相萃取小柱；(4)将洗脱液浓缩至干，加入乙酸盐缓冲溶液，得检测液；(5)利用高效液相色谱测定检测液中的可天宁。本发明首先将体液中可天宁完全萃取，然后经过固相萃取洗脱，从而实现其中可天宁的快速、准确定量分析。

主权项

分子印记固相萃取‑液相色谱测定体液中可天宁的方法，其特征在于：依次包括以下步骤：(1)将可天宁、单体、交联剂和引发剂、生孔剂超声脱气、通氮气后密封，在水浴下聚合，然后将聚合物研磨、筛分，收集25‑36μm的聚合物，用丙酮反复沉降去除细小颗粒后得到所需颗粒，将所需颗粒装入玻璃层析柱中，分别用100mL‑400mL的有机酸溶液和100mL‑300mL醇淋洗，洗脱印迹聚合物中的模板分子可天宁，洗脱后的聚合物颗粒置于烘箱中干燥，得合成的可天宁分子印记聚合物；(2)将合成的聚合物作为固相萃取吸附剂，称取200mg‑300mg装填于3mL的SPE聚丙烯空柱中，制备固相萃取小柱；(3)采用含有机酸、水的乙腈溶液、醇、缓冲溶液依次淋洗固相萃取小柱，采用缓冲溶液调节体液样品pH后上样，用缓冲溶液和有机胺的乙腈溶液淋洗小柱，去除体液样品中的盐及其它基体化合物，采用含有机酸、水的乙腈溶液对小柱进行洗脱；(4)分别收集步骤(3)淋洗、流出环节的溶液，浓缩至近干，加入乙酸盐缓冲溶液，得检测液；(5)利用高效液相色谱测定步骤(4)所得检测液中的可天宁：色谱条件：色谱柱：Zorbax SB‑C18(250×4.6mm，5μm，Agilent公司)；流动相：A相为缓冲盐溶液，B相为乙腈，等度洗脱，洗脱比例：A∶B＝88％∶12％；流动相中包含浓度为0.02mol/L庚烷基磺酸钠作离子对试剂；流速：1.0mL/min；检测器：二极管阵列检测器；检测波长为260nm；进样量：20μL。