[发明专利]哈维氏弧菌和副溶血弧菌二联DNA疫苗的制备方法和应用无效
| 申请号： | 201010186539.2 | 申请日： | 2010-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN101879317A | 公开（公告）日： | 2010-11-10 |
| 发明（设计）人： | 陈吉祥;刘瑞;何庆芳;徐广峰 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | A61K48/00 | 分类号： | A61K48/00;A61K39/106;A61P31/04;C12N15/62 |
| 代理公司： | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人： | 张中南 |
| 地址： | 266100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及哈维氏弧菌和副溶血弧菌二联DNA疫苗的制备方法和应用，其特征是将哈维氏弧菌oppA基因和副溶血弧菌tdh2基因通过6个核苷酸GAATTC相连成的tdh2-oppA融合基因蛋白真核表达工程载体疫苗；其制备方法包括：使基因tdh2和oppA克隆到线性载体pMD19-T Simple中；再通过双酶切技术，将该融合基因插入到真核表达载体pEGFP-N1中构建得到pEGFP-N1-tdh2-oppA融合基因蛋白真核表达工程载体疫苗；最后用常规的方法制成哈维氏弧菌和副溶血弧菌二联DNA疫苗悬液，以100μl/尾的剂量对鱼类进行免疫。本发明操作性强重复率高，安全无毒副作用，可对鱼类双重免疫保护，免疫效果较灭活疫苗、重组蛋白疫苗及普通DNA疫苗高。 | ||
| 搜索关键词： | 哈维 弧菌 溶血 二联 dna 疫苗 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种哈维氏弧菌和副溶血弧菌二联DNA疫苗，其特征在于：在真核表达载体上连接入副溶血弧菌溶血素亚单位基因tdh2和哈维氏弧菌寡肽结合蛋白基因oppA通过6个核苷酸GAATTC相连而成的tdh2-oppA融合基因，其中tdh2-oppA融合基因的DNA序列为：ATGAAGTACCGATATTTTGCAAAAAAATCATTTTTATTTATATCCATGTTGGCTGCATTCAAAACATTTGCCTTTGAGCTTCCATCTGTCCCTTTTCCTGCCCCCGGTTCTGATGAGATATTGTTTGTTGTTCGAGATACAACTTTTAATACCAATGCACCGGTCAATGTAGAGGTCTCTGACTTTTGGACAAACCGTAATGTAAAAAGAAAACCGTACAAAGATGTTTATGGTCAATCAGTATTCACAACGTCAGGTACTAAATGGCTGACATCCTACATGACTGTGAACATTAATGATAAAGACTATACAATGGCAGCGGTGTCTGGCTATAAGCACGGTCATTCTGCTGTGTTCGTAAAATCAGATCAAGTACAGCTTCAACATTCCTATGATTCTGTAGCTAACTTTGTTGGTGAAGATGAAGATTCTATTCCAAGTAAAATGTATTTGGATGAAACTCCAGAATATTTTGTTAATGTAGAAGCATATGAGAGTGGTAGTGGTAATATATTGGTAATGTGTATATCCAACAAAGAATCGTTTTTTGAATGTAAACATCAACAAGAATTCATGGATGCTAATGAAAAACTTGGAGTTTTACGCATGTACAAGAATAAAATCACCAAAGCCCTTCTTCTAGGTGCTGGTCTGGCAGTGGCTGCCTCTTCTACTACTACCGCTTTCGCTGCTGACGTTCCGGCAGGCATTAAACTAGCTGAAAAACAAGAAATCGTTCGTGGTAACGGAACTGAAGTGGCTACGATTGATCCACATAAGTCGTCTGGAGTACCTGAATCTCATGTGATTCGCGACCTTCTTGAAGGCCTTGTTAACCAAGACGGTGATGGCAATACAATTCCTGGTGTAGCAGAGAGTTGGGAGACAACAGATAACCAGACATTTACTTTTCATTTACGCAAAGATGCAAAGTGGTCTAACGGCGATCCTGTAACAGCACAAGATTTTGTATACAGTTGGCAGCGCTTTGTCGATCCTGCTACAGCCTCTCCATATGCTTGGTACATGGAGTTTACCAAGATGGTCAATGCTAAAGAAATTATTGAAGGTAAAAAAGAAAAAAGTACTCTGGGTGTTAAGGCGGTAGATGCGCACACACTAGTTGTTGAACTTGAAACTGCTGTGCCTTATTTTGTGATGATGGTAGGTCACACTTCAATGAAGCCAGTTCACAAGGCGACGATCGAGAAATACGGTGATCAATGGACTAAGCCTGGTCATTTTGTTGGTAACGGTGCTTACGAACTTGATAAGTGGGTCGTAAACGAGCGTATGGTTCTGAAGCGCAACGTGCAGTACTGGGATAACGACAAGTCTGTGATTGATAAAGTAACGTTCCTTCCGATAGAAAATCAAAATGCGGAAATGAATCGCTTTTTGTCTGGCGAGATTGACTTCACAGATGATTTGCCGATTGAACACTTTAAGCGCATGCAAAAAGAGCACCCAGAAGATCTGTCCGTTGTTGGCAGTCTGTGTAGTTATTACTACATATTTAACACTAAGAAAAAGCCGTTTAACGACTCTCGTGTTCGCAAAGCAATTTCTTATGCGATTGATCGTGATATCGTAGCGAATGCTATTATGGGACAAGGACAAAAGCCAGCGTATTTCTTAACACCTGAGATAACAGCCGGCTTTGATCCTGAATTGCCAGCATATGGTAGGATGACGCAAAAAGAGCGCAACGCAGAAGCCTCCCGACTGCTAGCCGAAGCAGGATATGGTAAAGATAATCCCTTAGAGTTTACATTCCTGTATAACACAGATGAAAACCACAAAAAACTTGCCGTCGCACTTGGCTCCATGTGGAAAAAGACATTAGGCTTGAAAGTTACTCTAGAAAACCAAGAGTGGAAAACGTACTTATCTTCTACGAAGACTGGTGATTTTGAGGTAGCCCGTGCGGGATGGTGTGGCGATTACAATGAAGCTTCCACATTTTTGACACTGATGACAAGTGACAATACGAGCGCTGGTCAGCACTGGGGTAATAATGATTACGATATACTGATCGATAATGCCTTCCACTCAACTTCAGAAGAAGAGCGCACTAAGTTTTATTTAGACGCTGAAAAACTAATGGCAAAAGAAATGCCAATTGCTCCAATTTATCAATACGTGAAGACTCGTTTACTTAACCCTCACGTTGGTGGCTTCCCTTCCAATAATGCGCAAGAAATGATCTACACCAAAGATCTTTACATCAAAGCAGACTAA。
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