[发明专利]一种从环境样品中提取高分子量基因组DNA的方法有效
| 申请号： | 201010190757.3 | 申请日： | 2010-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN102268426A | 公开（公告）日： | 2011-12-07 |
| 发明（设计）人： | 李旭东;郝纯;杨俊仕;刘庆华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院成都生物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 成都赛恩斯知识产权代理事务所(普通合伙) 51212 | 代理人： | 肖国华 |
| 地址： | 610041 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学技术领域，涉及一种环境样品中提取基因组DNA的方法。本发明方法包含包埋、破壁、消化、洗涤、电泳、胶回收、溶解步骤，用悬浮液悬浮环境样品，加入低熔点琼脂糖，室温冷却使凝固；将胶块放入破壁缓冲液中，温育，期间保持水平震荡；倒掉破壁缓冲液，加入消化缓冲液，温育，期间保持水平震荡；倒掉消化缓冲液，加入洗涤液洗涤，再用电泳缓冲液洗涤；将经破壁消化后的胶块切成小块，插入到低熔点琼脂糖凝胶的点样孔中，用低熔点琼脂糖凝胶封好点样孔的空隙后，在电泳缓冲液中电泳；染色后将含DNA的凝胶切下，用电洗脱法回收DNA；将电洗脱后得到的DNA晾干，溶于无菌去离子水或TE溶液，溶解液即为所提的DNA。本发明方法重复性好，操作较为简单，完全能满足建库等分子操作的要求。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 环境 样品 提取 分子量 基因组 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种从环境样品中提取高分子量基因组DNA的方法，其特征在于：包含包埋、破壁、消化、洗涤、电泳、胶回收、溶解步骤：包埋：用悬浮液悬浮环境样品，加入低熔点琼脂糖，室温冷却使凝固；破壁：将胶块放入破壁缓冲液中，温育，期间保持水平震荡；消化：倒掉破壁缓冲液，加入消化缓冲液，温育，期间保持水平震荡；洗涤：倒掉消化缓冲液，加入洗涤液洗涤，再用电泳缓冲液洗涤；电泳：将经破壁消化后的胶块切成小块，插入到低熔点琼脂糖凝胶的点样孔中，用低熔点琼脂糖凝胶封好点样孔的空隙后，在电泳缓冲液中电泳；胶回收：染色后将含DNA的凝胶切下，用电洗脱法回收DNA；溶解：将电洗脱后得到的DNA晾干，溶于无菌去离子水或TE溶液，溶解液即为所提的DNA。
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