[发明专利]丝网印刷电极的癌胚抗原工作电极的制备方法

摘要

本发明公开了丝网印刷电极的癌胚抗原工作电极的制备方法，通过CEA抗体和金磁纳米微粒的溶液混合，然后经CEA抗体包被在金磁纳米微粒表面的封闭处理，包被的CEA抗体被封闭固定，未包被的CEA抗体被分离，得到金磁纳米微粒-CEA抗体溶液，另外通过工作电极表面形成Nafion膜，然后将得到的金磁纳米微粒-CEA抗体吸附于Nafion膜上，得到金磁纳米微粒-CEA抗体-聚四氟乙烯的阳离子交换膜的癌胚抗原工作电极；本发明是一种检测的血清样品不必提纯处理，使用时无需外加电子媒介体，每次使用后电极表面可再生的丝网印刷电极的癌胚抗原工作电极的制备方法。

主权项

丝网印刷电极的癌胚抗原工作电极的制备方法，其特征在于包括下述步骤：1)将浓度为0.01～0.1mol·L 1的三羟甲基氨基甲烷 盐酸缓冲液5～10mL置于离心管中，再加入浓度为1mg·mL 1的金磁纳米微粒溶液5～10μL和浓度为1～3mg·mL 1的CEA抗体溶液10μL，在25～37℃下振荡反应20～30分钟；2)将上述离心管置于磁性分离器中，在0.1～0.3mT的磁场下磁性分离3～10分钟，弃上清液；3)再在离心管中加入pH7.0浓度为0.2～1mol·L 1的磷酸盐缓冲液5mL和浓度为10～15mg·mL 1的牛血清蛋白溶液5μL，室温下搅拌1小时，在0.1～0.3mT的磁场下磁性分离3～10分钟，弃上清液，重复本步骤3次，得到金磁纳米微粒 CEA抗体溶液备用；4)在工作电极表面滴涂含有普鲁斯蓝浓度为2～5mol·L 1和聚四氟乙烯质量百分浓度为5％的水溶液2 5μL，室温干燥后，得到固定有聚四氟乙烯阳离子交换膜的工作电极；5)在20～25μL浓度为0.2～1mol·L 1的磷酸盐缓冲液中，加入上述金磁纳米微粒 CEA抗体溶液2～5μL，然后将固定有聚四氟乙烯阳离子交换膜的工作电极浸入该磷酸盐缓冲液中，同时在该工作电极的背面加上0.1～0.3mT的磁场，让金磁纳米微粒 CEA抗体吸附于聚四氟乙烯的阳离子交换膜上，磁场作用10分钟，得到金磁纳米微粒 CEA抗体 聚四氟乙烯阳离子交换膜的癌胚抗原工作电极。