[发明专利]一种利用RP-HPLC分析氨基酸的方法无效
申请号: | 201010221070.1 | 申请日: | 2010-07-08 |
公开(公告)号: | CN101907615A | 公开(公告)日: | 2010-12-08 |
发明(设计)人: | 邓莉;郝学财;邢海鹏 | 申请(专利权)人: | 天津春发食品配料有限公司 |
主分类号: | G01N30/89 | 分类号: | G01N30/89;G01N1/28 |
代理公司: | 天津滨海科纬知识产权代理有限公司 12211 | 代理人: | 孙春玲 |
地址: | 300300 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种利用RP-HPLC分析氨基酸的方法,该方法包括步骤:取样品溶液50ml,以4000r/min离心10min,取上清液25ml,加入25ml质量分数为2%的三氯乙酸,放于4℃静置2h,再以4000r/min离心10min,取上清液2ml,过0.2μm微孔滤膜;取上述处理液0.5ml,加入DTDPA溶液0.5ml,混匀,置80℃水浴加热1小时得保护液;设置自动进样器进行柱前衍生:吸取保护液0.5μl,吸取0.5μl的OPA,混合,吸取0.5μl的FMOC加入混合,再吸取水32μl加入混合,进样,梯度洗脱和检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 rp hplc 分析 氨基酸 方法 | ||
【主权项】:
一种利用RP HPLC分析氨基酸的方法,该方法包括如下步骤:取样品溶液50ml,以4000r/min离心10min,取上清液25ml,加入25ml三氯乙酸(质量分数2%),放于4℃静置2h,再以4000r/min离心10min,取上清液2ml,过0.2um微孔滤膜;取上述处理液0.5ml,加入浓度为0.1g/ml,pH为10.0的DTDPA溶液0.5ml,混匀,置80℃水浴加热1小时;配置流动相A:0.1mol/L醋酸钠∶乙氰=93∶7,调PH值至6.5;流动相B:乙氰∶水=4∶1;设置自动进样器进行柱前衍生:吸取样品0.5ul,吸取0.5ul的浓度为2.5mg/ml的OPA,混合,吸取0.5ul的浓度为10mg/ml的FMOC加入混合,再吸取水32ul加入混合,进样;梯度洗脱条件为:色谱柱:C18反相色谱柱;洗脱液流速:2ml/min;检测波长为:338nm和262nm。
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