[发明专利]半滑舌鳎家系构建及优良家系选育方法

摘要

一种半滑舌鳎家系构建及优良家系选育方法，它的技术内容包括半滑舌鳎群体选育，半滑舌鳎家系构建，半滑舌鳎抗病家系及生长快速家系的筛选，本发明采用群体选育和种内杂交技术建立家系，然后采用人工感染途径从大量的家系中筛选出抗鳗弧菌病的家系，通过生长比较筛选出生长快的家系，这些优良家系鱼苗可直接进行推广应用，或用于半滑舌鳎高产抗病优良品种的培育。本发明具有针对性强、选育效率高、操作简单、效果明显等特点，建立的半滑舌鳎优良家系筛选方法为半滑舌鳎高产抗病优良品种培育开辟了新的技术途径，适宜在其它养殖鱼类上进行推广应用，对养殖鱼类高产抗病良种培育具有重要意义和应用价值。

主权项

一种半滑舌鳎家系构建及优良家系选育方法，其特征在于它的技术内容包括：(1)、半滑舌鳎群体选育；(2)、半滑舌鳎家系构建；(3)、半滑舌鳎抗病家系及生长快速家系的筛选；(1)、半滑舌鳎群体选育：包括：半滑舌鳎野生群体、人工养殖群体的选育；野生群体的选育：收集从渤海湾捕捞的半滑舌鳎鱼苗或鱼种，选择体表没有伤痕，健康活力强的鱼苗或鱼种作为野生群体，放养在水泥池中进行养殖，当鱼苗生长到12-18厘米时，鉴定鱼苗的性别后，将雌、雄鱼苗分开养殖；经过2-3年养殖后，再按照1％的比例分别从雌鱼群体和雄鱼群体中各选出个体大的40-50尾鱼作为雌、雄亲鱼，用于家系构建；人工养殖群体的选育：人工养殖群体为半滑舌鳎养殖场人工繁殖的鱼苗，从山东等地半滑舌鳎养殖场培育的鱼苗中筛选出生长快的个体进行培育，再从人工养殖2-3年的10000尾半滑舌鳎雌性成鱼中选择最大个体50尾用作雌性亲鱼，从人工养殖2年的2500-5000尾半滑舌鳎雄性成鱼中选择个体大的25-50尾用作雄性亲鱼，经过强化培育后，作为繁殖用亲鱼，用于家系构建；(2)、半滑舌鳎家系构建：从半滑舌鳎野生群体和人工养殖群体中选取性成熟的健康亲鱼，在每年6-9月份通过控温控光诱导亲鱼性腺发育和成熟；当雌鱼腹部明显隆起、性腺长度达到体长的约一半时，对雌雄鱼进行人工催产，获得成熟雄鱼的精液和成熟雌鱼的卵子；利用来自1尾雄鱼的精液和来自1尾雌鱼的卵子进行干法授精，将交配产生的受精卵放在一个具有微流水及微充气的网箱中进行孵化，一个网箱只放一个家系的受精卵；在鱼苗即将孵化出膜时，将其转移到2-3立方米体积的育苗缸中进行培育，每个缸中只放一个家系的鱼苗，每立方米水体培育5000-8000尾仔鱼；每次应该建立20-40个家系，每个家系应该培育500-1000尾鱼苗用于抗病和高产家系的筛选；(3)、半滑舌鳎抗病家系及生长快速家系的筛选：A.半滑舌鳎抗病家系的筛选：当半滑舌鳎各个家系鱼苗生长至10-12cm时，采用浸泡方法对各个家系鱼苗进行鳗弧菌感染，评价各家系鱼苗的抗鳗弧菌病能力，感染所用的鳗弧菌菌株的培养按照常规方法进行；首先进行预感染实验确定菌液半致死浓度，预感染实验用的鱼苗，为来自10个家系的相同数量鱼苗的混合群体，每个家系取50-100尾鱼苗混合在一起；预感染时，将培养好的菌液用生理盐水稀释成浓度为2.0-3.0OD的菌液，将上述菌液用新鲜海水稀释成50、100、200、300、400、600倍不同的浓度，将混合鱼苗随机分成6组，每组80-150尾鱼苗，将每组80-150尾混合家系鱼苗放在一个浓度菌液的海水中浸泡3-5小时后，6组鱼苗放在6个不同菌液浓度的海水中浸泡感染，感染时水温控制在21-23℃，感染后将鱼苗转到微流水及微充气的海水中饲养，在随后的15-20天内计算各个浓度组的鱼苗死亡率，将引起40-60％鱼苗死亡的菌液浓度确定为半致死浓度；采用半致死浓度进行正式感染实验，感染方法同预感染实验；不同家系分别进行感染，每个家系每次感染50-100尾鱼苗，重复实验1次；感染用鱼养殖在0.3-1m3的玻璃钢水槽中；感染后，每天对各个家系鱼苗的状态及死亡数量进行观察记录，测量死亡个体的全长及体重；在感染后20-30天，记录所有家系的鱼苗存活数量，测量存活鱼苗的全长和体重；根据参加感染鱼苗的数量以及感染后的存活数量，计算各个家系的鱼苗存活率，评价各家系的抗病性能；将成活率在55％以上的家系定义为抗病力强的家系，成活率在40-55％的家系定义为抗病力较强家系，成活率在20-40％的家系定义为抗病力一般的家系，成活率在20％以下的家系定义为抗病力差的家系；B、半滑舌鳎快速生长家系的筛选：当半滑舌鳎各个家系鱼苗生长至全长为10-12cm时，从每个家系未感染的鱼苗中选取200尾，采用荧光颜料标记不同家系的鱼苗，标记后的鱼苗混养在35-40m3的水泥池中；在养殖8-15个月后收集各家系鱼苗进行全长和体重测量；每个家系的鱼苗采样60-100尾进行测量，计算各个家系全长和体重的平均数；利用日增重率，即：养殖期间增加的重量/实际养殖时间，评价不同家系的生长性能；日增重率越大，其生长速度越快、生长性能越好；将日增重率在0.25以上的家系确定为快速生长家系，日增重率在0.2-0.25之间的家系确定为较快生长家系，日增重率在0.2以下的家系确定为生长速度一般的家系。