[发明专利]提高产1,3-丙二醇融合菌筛选效率的方法无效
申请号: | 201010221995.6 | 申请日: | 2010-07-07 |
公开(公告)号: | CN102311947A | 公开(公告)日: | 2012-01-11 |
发明(设计)人: | 金平;王领民;师文静;李晓姝;王崇辉 | 申请(专利权)人: | 中国石油化工股份有限公司;中国石油化工股份有限公司抚顺石油化工研究院 |
主分类号: | C12N15/03 | 分类号: | C12N15/03 |
代理公司: | 抚顺宏达专利代理有限责任公司 21102 | 代理人: | 李微 |
地址: | 100728 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种提高产1,3-丙二醇融合菌筛选效率的方法,主要过程包括:选择亲本菌株;亲本菌株进行酶解脱壁得到原生质体;原生质体进行灭活处理;灭活的原生质体进行原生质体融合;筛选融合子,选择性能优良的目的融合菌;优良融合菌株作为亲本进入下一轮基因组重排过程,至获得综合性能优良的菌株;其中亲本菌株酶解脱壁得到的原生质体或灭活原生质体进行膜过滤处理后进行后续处理操作。与现有基因工程融合菌筛选方法相比,本发明方法可以有效提高目标菌株的筛选效率,同时具有操作方便,不需昂贵的实验仪器,适合于工业菌株育种等优点。 | ||
搜索关键词: | 提高 丙二醇 融合 筛选 效率 方法 | ||
【主权项】:
一种提高产1,3 丙二醇融合菌筛选效率的方法,包括如下过程:(1)选择亲本菌株,或菌种经适宜培养得到亲本菌株;(2)亲本菌株进行酶解脱壁得到原生质体;(3)原生质体进行灭活处理得到灭活原生质体;(4)灭活的原生质体进行原生质体融合;(5)用含有目的发酵产物的培养基筛选融合子,选择性能优良的目的融合菌;(6)步骤(5)获得的优良融合菌株作为亲本进入下一轮基因组重排过程,至获得综合性能优良的菌株;其特征在于:步骤(2)的亲本菌株酶解脱壁得到的原生质体或步骤(3)的灭活原生质体进行膜过滤处理,膜过滤处理采用0.15~0.85μm滤膜过滤除去对原生质体融合有影响的菌体,然后进行后续处理操作。
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