[发明专利]铁皮石斛自然光快繁育苗方法

摘要

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种珍稀濒危中药材铁皮石斛自然光快繁育苗方法。本发明的目的在于利用现代生物技术，大胆突破传统利用日光灯管提供光照培养苗的方法，在国内首家采用自然光快繁育苗，通过合理配置遮阳系统，提供更为适宜的光照度来培养苗，取得了良好成效，一颗铁皮石斛蒴果通过5～6月的组培培养可快繁培育出12万株以上石斛组培苗。本发明方法提高了铁皮石斛种苗的扩繁速度和生产量，节约了能源，降低了组培生产成本，提高了组培苗的炼苗移栽成活率，对濒危紧缺药用植物资源再生和持续利用具有十分积极的影响。

主权项

一种铁皮石斛自然光快繁育苗方法，其特征在于该方法降低能耗、降低组培成本，可大量快速培育出合格的铁皮石斛试管苗，包括下列步骤完成：(1)将成熟的铁皮蒴果或储存的种子经过消毒处理程序，播入1/2MS基本培养基+土豆汁15％(V/V)+琼脂5g/L的培养基里，进行种子萌发培养，培养温度22～25℃。通过双层遮阳控制系统，光照度控制在800～1500lx，每日光照10～12小时，约15～20天种胚膨大、萌发形成绿色的原球茎；(2)将原球茎转入MS基本培养基+BA(6‑苄基腺嘌呤)0.01～0.5mg/L+NAA(α‑萘乙酸)0.01～0.5mg/L+土豆汁20％(V/V)+琼脂5g/L的培养基里进行原球茎增殖、分化培养。通过双层遮阳控制系统，光照度控制在1500～2500lx，每日光照10～12小时，约1～1.5月可观察到瓶内原球茎重叠堆积在培养基中，并有叶原茎和小苗出现，小苗高度1～2cm。将小苗转入同样的培养基和同样的光照条件，继续培养1.5月，将小苗培养成中苗，苗高3～4cm左右；(3)将中苗转入MS基本培养基+NAA(α‑萘乙酸)0.01～0.5mg/L+香蕉汁15％(V/V)+土豆汁10％(V/V)+琼脂6g/L的壮苗培养基。通过双层遮阳控制系统，光照度控制在2000～4000lx，每日光照10～12小时，约1.5个月可培养出5cm高以上的大苗，大苗可出瓶炼苗、移栽。