[发明专利]一种重组减蛋综合症病毒纤维蛋白抗原的制备方法无效
| 申请号： | 201010257827.2 | 申请日： | 2010-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN101955950A | 公开（公告）日： | 2011-01-26 |
| 发明（设计）人： | 李荣贵;李莹;孙志豪;周立桥;李金华 | 申请（专利权）人： | 青岛大学;周立桥;李金华 |
| 主分类号： | C12N15/34 | 分类号： | C12N15/34;C12N15/70;C07K14/075;C07K1/22;C07K1/14 |
| 代理公司： | 青岛高晓专利事务所 37104 | 代理人： | 隋臻玮 |
| 地址： | 266071 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种重组减蛋综合症病毒纤维蛋白抗原的制备方法。首先利用PCR技术从减蛋综合症病毒基因组中克隆纤维蛋白C-末端的编码基因并进行序列分析；然后将该基因克隆到表达载体pET-15b，转化大肠杆菌后构建工程菌，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导工程菌表达纤维蛋白C-末端；最后裂解工程菌细胞，离心分离其中的包含体，尿素溶解后，再用镍离子敖和树脂亲和纯化重组蛋白，稀释复性，利用Western blotting技术检测重组蛋白的免疫原性。利用该方法制备的重组蛋白与感染了减蛋综合症病毒鸡的血清有明显的免疫反应，可应用于预防家禽减蛋综合症的基因工程疫苗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 综合症 病毒 纤维蛋白 抗原 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种重组减蛋综合症病毒纤维蛋白抗原的制备方法，其特征在于：首先利用PCR技术从减蛋综合症病毒基因组中克隆纤维蛋白C‑末端的编码基因并进行序列分析；然后将该基因克隆到表达载体pET‑15b，转化大肠杆菌后构建工程菌，异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷诱导工程菌表达纤维蛋白C‑末端；最后裂解工程菌细胞，离心分离其中的包含体，尿素溶解后，再用镍离子敖和树脂亲和纯化重组蛋白，稀释复性，利用Western blotting技术检测重组蛋白的免疫原性。
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