[发明专利]重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体rhTNK-tPA的纯化方法有效

专利信息
申请号: 201010263862.5 申请日: 2010-08-25
公开(公告)号: CN101942429A 公开(公告)日: 2011-01-12
发明(设计)人: 杨琴;曹凤兰;王志坚;吴宜南;董珣;梁银冰 申请(专利权)人: 广州铭康生物工程有限公司
主分类号: C12N9/48 分类号: C12N9/48
代理公司: 广州知友专利商标代理有限公司 44104 代理人: 李海波
地址: 510730 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 一种重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体rhTNK-tPA的纯化方法,其包含以下步骤:(1)将rhTNK-tPA的细胞培养液过滤后取上清液,经Blue Sepharose 6Fast Flow亲和柱层析后,用洗脱液a洗脱后得含目标峰的洗脱液a1;(2)将步骤(1)所得的含目标峰的洗脱液a1进行Lysine HyperD亲和柱层析后,用洗脱液b洗脱得含目标峰的洗脱液b1;(3)取步骤(2)所得的含目标峰的洗脱液b1进行Sephadex G-25凝胶过滤,经洗脱液c洗脱后得纯化的重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体rhTNK-tPA。该方法载量高,流速快,再生容易,过程简便、成本低,可线性放大,可用于大规模生产。
搜索关键词: 重组 组织 型纤溶酶原 激活剂 tnk 突变体 rhtnk tpa 纯化 方法
【主权项】:
一种重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体rhTNK‑tPA的纯化方法,其特征在于包含以下步骤:(1)将rhTNK‑tPA的细胞培养液过滤后取上清液,经Blue Sepharose 6FastFlow亲和柱层析后,用洗脱液a洗脱后得含目标峰的洗脱液a1;(2)将步骤(1)所得的含目标峰的洗脱液a1进行Lysine HyperD亲和柱层析后,用洗脱液b洗脱得含目标峰的洗脱液b1;(3)取步骤(2)所得的含目标峰的洗脱液b1进行Sephadex G‑25凝胶过滤,经洗脱液c洗脱后即得纯化后的重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体rhTNK‑tPA。
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