[发明专利]一种双果糖酐Ⅲ的双酶耦合制备方法

摘要

一种双果糖酐III的双酶耦合制备方法，属于功能性食品生物加工技术领域。本发明以蔗糖为底液，采用蔗糖果糖转移酶和菊糖果糖转移酶，通过双酶耦合催化反应来合成双果糖酐III。蔗糖底物浓度控制在20～300g/L，先用蔗糖果糖转移酶反应，添加量为1～20U/g底物，在30～55℃催化反应4～12小时，再加入菊糖果糖转移酶，添加量为2～15U/g底物，在40～60℃催化反应12～36小时，生物转化率超过35％。本发明生产方法简单，对环境无污染，所得到的双果糖酐III安全可靠，属于一种市场前景广阔的低热量新型甜味剂。

主权项

一种双果糖酐III的双酶耦合制备方法，其特征在于步骤为：A、将蔗糖作为底物溶于去离子水中，配成蔗糖反应底物，蔗糖反应底物浓度控制在20～300g/L，调节pH值5～7，升温至30～55℃，加入蔗糖果糖转移酶，加入量为1～20U/g蔗糖，恒温反应4～12小时；B、在步骤(A)之后，再加入菊糖果糖转移酶，加入量为2～15U/g蔗糖，调节pH值5～7，利用双酶耦合催化反应技术，40～60℃保温反应12～36小时，转化率达35％以上；C、将步骤(B)所得转化产物溶液加热，灭酶活，加入所得体系质量分数1％～3％的活性炭，脱色过滤；浓缩至有少量晶体析出后，向浓缩液中加入浓缩液2～5倍体积的乙醇，冷却结晶；离心去除上清液后，用乙醇清洗晶体表面残留液，干燥后得到双果糖酐III粗品；D、重结晶：将得到的双果糖酐III粗品按质量分数10％～30％的浓度溶解于去离子水中，升温至70～80℃，加入双果糖酐III粗品质量分数3％的活性炭，脱色过滤，浓缩至有少量晶体析出后，向浓缩液中加入浓缩液2～5倍体积的乙醇，冷却结晶，离心去除上清液后，用乙醇清洗晶体表面残留液，干燥后得到双果糖酐III成品。