[发明专利]一种利用球形节杆菌进行强心苷苷元类化合物C16,17位脱氢的方法

摘要

本发明涉及一种利用球形节杆菌的生物脱氢反应对强心苷苷元类化合物C16，17位进行结构改造的生物学方法。步骤为：将强心苷苷元类化合物为底物，采用球形节杆菌为菌种，经过一级种子培养和二级发酵培养，在菌体发酵液中投入底物进行转化反应，经有机溶剂萃取和硅胶分离与纯化得到C16，17脱氢产物。本发明采用工业微生物球形节杆菌对强心苷苷元类化合物进行生物脱氢转化，高效、专一地在强心苷苷元类化合物母核D环C16，17位点形成新的双键，扩大了球形节杆菌ATCC31250的应用范围，得到新型转化反应和具有新颖结构的强心苷类化合物。

主权项

一种利用球形节杆菌进行强心苷苷元类化合物C16，17位脱氢的方法，其特征在于：步骤是：(1)种子与发酵培养：取球形节杆菌ATCC31250菌种接种于一级种子培养基中，140‑180r/min、30‑34℃、培养20‑30h，得到种子培养液，以5％‑10％接种量转接于新鲜的发酵培养基，进行二级发酵培养，得到菌体发酵液；(2)转化：在菌体发酵液中加入强心苷苷元类化合物，30‑35℃，150‑200r/min转化70‑80h后终止反应；(3)产物的提取与精制：步骤(2)转化反应结束后，抽滤，分离菌丝体和发酵液，分别用有机溶剂萃取菌丝体和发酵液数次，合并萃取液，干燥，减压浓缩，浓缩后采用硅胶色谱柱分离得到强心苷苷元类化合物C16，17位脱氢产物；所述的球形节杆由美国典型微生物菌种保藏中心保存，编号为：ATCC 31250。