[发明专利]一种构建T载体的方法有效
| 申请号： | 201010281650.X | 申请日： | 2010-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN101948862A | 公开（公告）日： | 2011-01-19 |
| 发明（设计）人： | 李艳萍 | 申请（专利权）人： | 原平皓(天津)生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 逯长明 |
| 地址： | 300457 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种构建T载体的方法。该方法以pGEM-T Easy Vector、pBS-T Vector、pSURE-T Vector为出发载体与Xcm I盒连接得到前T载体，然后用Xcm I限制性内切酶酶切前T载体，回收线性化载体，得到T载体，所述Xcm I盒序列包括间隔DNA序列和紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个附加序列，所述附加序列包括Xcm I酶切位点序列和Xcm I酶切位点序列5′端的3个保护碱基。本发明所述构建T载体的方法简单高效，所获得的T载体质量稳定，自身环化率低，克隆效果高，并且可以避免3n+2个核苷酸的cDNA序列在基因表达时发生移码。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 载体 方法 | ||
【主权项】：
一种构建T载体的方法，包括：步骤1：出发载体与Xcm I盒连接，得前T载体；步骤2：Xcm I限制性内切酶酶切步骤1所得前T载体，回收线性化载体，得到T载体；其中，所述出发载体为pGEM‑T Easy Vector、pBS‑T Vector、pSURE‑TVector，所述Xcm I盒序列包括间隔DNA序列和紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个附加序列，所述附加序列包括Xcm I酶切位点序列和XcmI酶切位点序列5′端的3个保护碱基。
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