[发明专利]一种有菌肿瘤组织全抗原的灭菌处理方法

摘要

本发明公开了一种有菌肿瘤组织全抗原的灭菌处理方法。肿瘤标本切碎后经反复冻融、离心后得到肿瘤全抗原。用酶标仪检测肿瘤全抗原的蛋白浓度后，将提取的肿瘤全抗原按100ng/ml加入培养好的DC细胞中，同时加入万古霉素25～80μg/ml和亚胺培南西司他丁钠8μg～66μg/ml，再经过2～72小时共培养，即实现肿瘤组织全抗原的灭菌。该方法既考虑了使用的安全性、有效性，使用的剂量小、成本低，同时尽可能的节约患者的有限的肿瘤标本，充分利用资源，提高患者的疗效。其操作简便、成本低廉，灭菌效果显著，具有良好地应用前景。

主权项

一种有菌肿瘤组织全抗原的灭菌处理方法，包括以下步骤：(1)制备肿瘤全抗原：①将手术切出的肿瘤标本置于无菌缸中保存；②在无菌环境下，用含庆大霉素100～160IU/ml的无菌生理盐水冲洗肿瘤标本2～3次；③将肿瘤标本分切成组织块后置于冻存管中，在‑86℃～‑156℃环境下冻存、备用；④取出肿瘤组织块，在无菌环境下反复冲洗、弃除血液，然后将组织块剪碎；⑤将剪碎的肿瘤组织置于冻存管中，按体积比1∶5加生理盐水，在液氮和37℃水浴锅中反复冻融5～6次；⑥冻融后的肿瘤组织13000g～14000g离心18～22min，取上清液即为肿瘤全抗原，于‑86℃～‑156℃环境下冻存；(2)肿瘤全抗原灭菌处理：①检测肿瘤全抗原的蛋白含量；②根据步骤①所测的肿瘤全抗原的蛋白含量，将提取的肿瘤全抗原按100ng/ml加入培养好的DC细胞中，同时加入万古霉素25～80ug/ml和亚胺培南西司他丁钠8ug～66ug/ml，再经过2～72小时共培养，即完成肿瘤组织全抗原的灭菌。