[发明专利]一种可打破免疫耐受的三质粒共免疫疫苗系统及制备方法

摘要

本发明属于生物基因工程领域，提供了一种可打破免疫耐受的三质粒共免疫疫苗系统，含有三种独立的基因编码质粒，第一种是特异性靶抗原编码质粒，第二种是具有可局部富集DC的趋化因子编码质粒，第三种是可促进DC增殖成熟的细胞因子编码质粒，第一种、第二种和第三种编码质粒的质量比为100∶2-8∶2-8。本发明还提供了上述的可打破免疫耐受的三质粒共免疫疫苗的制备方法，本发明的疫苗针对乙肝耐受和结核耐受个体，克服常规疫苗无法在耐受机体内诱导免疫的缺点，试验证实可通过增强DC富集和DC增殖成熟，增强诱导的特异性抗体和T细胞应答水平，打破了免疫耐受，显著降低HBV的转录复制水平，具有治疗慢性乙肝或结核的效果。

主权项

一种可打破免疫耐受的三质粒共免疫疫苗系统，其特征在于：含有三种独立的基因编码质粒，第一种编码质粒是特异性靶抗原编码质粒，第二种编码质粒是具有可局部富集树突状细胞的趋化因子编码质粒，第三种编码质粒是可促进树突状细胞增殖成熟的细胞因子编码质粒，所述的第一种特异性靶抗原编码质粒是以真核表达质粒为载体，克隆有人类乙型肝炎病毒表面抗原S蛋白编码基因，所述的人类乙型肝炎病毒表面抗原S蛋白的基因序列如SEQ ID NO：1所示，所述的第二种具有可局部富集树突状细胞的趋化因子编码质粒是以真核表达质粒为载体，克隆有小鼠来源的肝脏激活调控的趋化因子编码基因，所述的小鼠来源的肝脏激活调控的趋化因子的基因序列如SEQ ID NO：3所示，所述的第三种可促进树突状细胞增殖成熟的细胞因子编码质粒以真核表达质粒为载体，克隆有人来源的fms样酪氨酸激酶3配体胞外段编码基因，所述的人来源的fms样酪氨酸激酶3配体胞外段编码基因的基因序列如SEQ ID NO：5所示，特异性靶抗原编码质粒、具有可局部富集树突状细胞的趋化因子编码质粒和可促进树突状细胞增殖成熟的细胞因子编码质粒的质量比为100∶2‑8∶2‑8。