[发明专利]一种重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽的生产方法有效
| 申请号： | 201010284844.5 | 申请日： | 2010-09-09 |
| 公开（公告）号： | CN102336829A | 公开（公告）日： | 2012-02-01 |
| 发明（设计）人： | 郭旺明;朱晴羽;王同映 | 申请（专利权）人： | 杭州九源基因工程有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C07K1/20;C07K1/18 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 徐关寿 |
| 地址： | 310018 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 一种重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽的生产方法本发明涉及一种重组人形态发生蛋白2成熟肽的生产方法。该方法通过将复性好的重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽溶液上样于经平衡好的疏水层析柱，然后用洗脱缓冲液进行盐浓度逐步降低的阶梯梯度洗脱，收集目标峰。为进一步提高目标峰的蛋白纯度，纯化方法可以是多步疏水作用层析或者与离子交换层析联合使用。该方法具有操作更简便、成本更低廉、纯化收率更高(大于20％)、纯度更高(SDS-PAGE、HPLC及HPCE均大于97％)等优点，适合用于重组人骨形态发生蛋白家族的生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 形态 发生 蛋白 成熟 生产 方法 | ||
【主权项】：
一种重组人骨形态发生蛋白‑2成熟肽的纯化生产方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将复性好的重组人骨形态发生蛋白‑2成熟肽溶液上样于经平衡好的疏水层析柱，上样完毕后继续用平衡缓冲液冲洗到达基线，所述的平衡缓冲液包含10‑30mM 2‑环己胺基乙磺酸、0.2‑1M尿素、2‑10％N，N‑二甲基甲酰胺、1‑3M氯化钠或者硫酸铵，pH为7.0‑9.0；(2)用洗脱缓冲液进行盐浓度逐步降低的阶梯梯度洗脱，收集目标峰，所述的洗脱缓冲液包含10‑30mM 2‑环己胺基乙磺酸、0.2‑1M尿素、2‑10％N，N‑二甲基甲酰胺，pH为7.0‑9.0。
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