[发明专利]一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法有效
申请号: | 201010503369.6 | 申请日: | 2010-10-12 |
公开(公告)号: | CN102443047A | 公开(公告)日: | 2012-05-09 |
发明(设计)人: | 胡又佳;刘艳;朱春宝;朱宝泉;刘红;龚桂花 | 申请(专利权)人: | 上海医药工业研究院 |
主分类号: | C07K1/36 | 分类号: | C07K1/36;C07K1/30;C07K1/28;C07K1/26 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人: | 薛琦;朱水平 |
地址: | 200040*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法,包括以下步骤:将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后,用TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白样品;将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后,水化上样,采用IPG固相胶条,然后进行等电聚焦,等电聚焦完成后,将胶条平衡后转移至SDS-PAGE凝胶上,进行电泳,当溴酚蓝指示剂到达底部边缘时停止电泳,得凝胶;将所得的凝胶经染色后,用凝胶扫描仪透射扫描,将得到的图像用软件进行分析。头孢菌素C在生产头孢类抗生素中具有重要地位,可由此开展对顶头孢霉的蛋白质组学研究,为优化头孢菌素产生菌的分子育种及代谢工程打下基础,具有重要的意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 头孢 蛋白质 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后,用TCA‑丙酮沉淀法提取总蛋白样品;将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后,水化上样,采用IPG固相胶条,然后进行等电聚焦,等电聚焦完成后将胶条平衡,然后转移至SDS‑PAGE凝胶上进行电泳,当溴酚蓝指示剂到达底部边缘时停止电泳,得凝胶;将所得的凝胶经染色后,用凝胶扫描仪透射扫描,将得到的图像用软件进行分析。
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