[发明专利]一种获得甜辣椒双单倍体植株的方法

摘要

本发明提供一种获得甜辣椒双单倍体植株的方法，其步骤如下：(1)选取小孢子发育处于单核靠边期至双核早期的供体植株的花蕾，4℃预处理1-3天；(2)剥去花萼后，先用酒精浸泡，再用次氯酸钠振荡消毒，然后用无菌水清洗；(3)将花药剥离，以每60mm直径培养皿12-18枚花药的密度接种于N4-3固液双层培养基上；(4)花药先在28-35℃条件下黑暗培养1-10天，再转移到25-28℃条件下继续黑暗培养；(5)培养4-7周时间，待大量胚状体发生时，将子叶型胚状体转移到不加激素的MS基本培养基上，培育壮苗。经过本发明培育方法，胚状体发生率突破了基因型的限制，甜辣椒的培养效率得到了大幅度提高，同时DH株比率也得到了提高。

主权项

一种获得甜辣椒双单倍体植株的方法，其特征在于，步骤如下：(1)选取小孢子发育处于单核靠边期至双核早期的甜辣椒供体植株的花蕾，4℃低温预处理花蕾1‑3天；(2)取花瓣不短于花萼的花蕾，剥去花萼后，先用75％(v/v)的酒精浸泡30s，再用8‑10％(v/v)的次氯酸钠振荡消毒10‑20min，然后用无菌水清洗3次，每次3‑5min；(3)将花药完整地剥离，以每60mm直径培养皿接种12‑18枚花药的密度接种于N4‑3固液双层培养基上，其中，所述N4‑3固液双层培养基的配方为：固体层：NTH培养基+3‑6％蔗糖+0.5％活性炭+0.8％琼脂粉，其中蔗糖、活性炭和琼脂粉的含量分别是它们相对于所述NTH培养基的重量百分比；液体层：NTH培养基+3‑6％蔗糖+IAA 0.5‑1.5mg/L+6‑BA 0.1‑0.6mg/L+戊炔草胺0.1‑0.5mg/L，其中蔗糖含量是它相对于NTH培养基的重量百分比；所述固体层经121℃高压灭菌；所述液体层抽滤灭菌；(4)花药先在28‑35℃条件下黑暗培养1‑10天，再转移到25‑28℃条件下继续黑暗培养；(5)培养4‑7周时间，待胚状体发生时，将子叶型胚状体转移到不加激素的MS基本培养基上，培育壮苗。