[发明专利]一种提取鱼类基因组DNA的方法有效
| 申请号： | 201010509719.X | 申请日： | 2010-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN101967473A | 公开（公告）日： | 2011-02-09 |
| 发明（设计）人： | 贾智英;石连玉 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人： | 何强 |
| 地址： | 150070 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 一种提取鱼类基因组DNA的方法，它涉及一种提取基因组DNA的方法。它解决了目前鱼类普通PCR反应模板提取工作量大、时间长的问题。本发明方法：一、鱼类采集样品制备；二、鱼类基因组DNA提取；三、PCR扩增。本发明方法可用于鱼类基因组DNA的提取。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提取 鱼类 基因组 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种提取鱼类基因组DNA的方法，提取鱼类基因组DNA的方法按以下步骤实现：一、鱼类采集样品制备；二、鱼类基因组DNA提取；三、PCR扩增；其特征在于步骤二是将碱性反应液加入装有鱼类采集样品的试管并没过鱼类采集样品，然后置于95±2℃的环境中作用30～90min，再冰浴，加入与碱性反应液等体积的中和反应液并震荡2～3min，然后离心保留离心上清液，即得到鱼类基因组DNA模板；步骤二中碱性反应液由乙二胺四乙酸二钠溶液和氢氧化钠溶液组成，碱性反应液中乙二胺四乙酸二钠的浓度为0.2mmol/L、氢氧化钠的浓度为25mmol/L；步骤二中中和反应液是浓度是40mmol/L、pH值为8.0的Tris‑HCL；步骤三PCR扩增反应体系为15μL由1.5μL的10×PCR buffer、0.3μL浓度为10mmol/L的dNTP、0.6U的TaqDNA聚合酶、1μL鱼类基因组DNA模板、1μL浓度为0.1μmol/L的上游引物、1μL浓度为0.1μmol/L的下游引物和余量的灭菌双蒸水组成。
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