[发明专利]抑制膜蛋白受体聚集的抗癌药物鉴定方法

摘要

本发明公开了一种抑制膜蛋白受体聚集的抗癌药物鉴定方法。该方法包括如下步骤：1)向离体的癌症细胞中转入靶标膜蛋白受体的基因，所述靶标膜蛋白受体的基因被荧光蛋白标记，得到重组癌症细胞；2)将重组癌症细胞和待鉴定物质进行孵育，孵育完毕后再加入靶标膜蛋白受体的配体进行孵育，孵育完毕后加入多聚甲醛的PBS溶液将重组癌症细胞进行固定，得到待检测细胞样品I；3)将待检测细胞样品I单分子荧光成像，得到细胞图像，进而得到各个荧光点的漂白步数，分析图像统计其荧光点的漂白步数，以判断该待鉴定物质是否对膜蛋白受体聚集具有抑制作用。该方法具有操作简便，快捷，鉴定周期短，花费小，可以鉴定各种抑制膜蛋白受体聚集的药物。

主权项

一种抗癌药物的鉴定方法，包括如下步骤：1)向离体的癌症细胞中转入靶标膜蛋白受体的基因，所述靶标膜蛋白受体的基因被荧光蛋白标记，得到重组癌症细胞；2)将所述步骤1)所得重组癌症细胞和待鉴定物质进行孵育，孵育完毕后再加入所述靶标膜蛋白受体的配体进行孵育，孵育完毕后将所述重组癌症细胞进行固定，得到待检测细胞样品I；3)将步骤2)得到的待检测细胞样品I置于全内反射显微镜的物镜上进行单分子荧光成像，得到所述待检测细胞样品的细胞图像，进而得到各个荧光点的漂白步数B；4)将所述步骤1)所得重组癌症细胞和所述靶标膜蛋白受体的配体进行孵育，孵育完毕后将所述重组癌症细胞进行固定，得到待检测细胞样品II，将所述待检测细胞样品II按照与步骤3)完全相同的步骤进行单分子荧光成像，得到各个荧光点的漂白步数A；5)如果所述漂白步数B中的两步漂白所得二聚体的比例小于所述漂白步数A中两步漂白所得二聚体的比例，则所述待鉴定物质为候选的抗癌药物。