[发明专利]一种适用于核盘菌菌株抗药性检测试剂盒及检测核盘菌菌株抗药性的方法

摘要

本发明属于植物病原真菌抗药性快速检测技术领域，具体涉及一种植物病原真菌核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)菌株抗药性快速、简单实用的检测试剂盒，适用于核盘菌对大田常用杀菌剂多菌灵或菌核净的快速抗性检测及分析。本发明以田间采集的核盘菌菌核为材料，以药剂对菌核萌发的抑制作用为指标，以培养基颜色变化为依据的检测方法，能在前季油菜收获后及时检测核盘菌的抗药性，在4天内进行大量、简便的检测，根据颜色变化辨别抗药性菌株，结果直观、明显，准确率可以达到100％，对采取有效措施控制来年油菜菌核病具有实用价值。此外，将该方法与基于PCR技术的方法结合，可能获得抗药机理不同的抗药性菌株，为研究核盘菌的抗药性机理提供菌株材料。

主权项

一株核盘菌菌株抗药性检测试剂盒，其特征包括下列培养基：1)PDA/溴酚蓝基本培养基：去皮马铃薯200g，葡萄糖20g和少量蒸馏水煮制15min左右，过滤弃去马铃薯残渣，收集滤液，补充蒸馏水定容至1000ml，定容后按0.1g/1000ml培养基的比例添加溴酚蓝，充分溶解后，于121℃高压灭菌20min，备用，在无菌条件下于培养基凝固前添加500mg/L的头孢曲松钠，将其分装于内径为22mm，外径为25mm，高为96mm塑料螺旋管中，于4℃下保存；2)抗药性筛选培养基1：以PDA/溴酚蓝基本培养基为基本培养基，附加多菌灵5mg/L，过滤除菌，滤膜孔径22um，于4℃下保存；3)抗药性筛选培养基2：以PDA/溴酚蓝基本培养基为基本培养基，附加菌核净5mg/L，过滤除菌；滤膜孔径22um，于4℃下保存。