[发明专利]基于细菌遗传转化的纳米材料遗传毒性检测方法无效
| 申请号： | 201010547896.7 | 申请日： | 2010-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN101979662A | 公开（公告）日： | 2011-02-23 |
| 发明（设计）人： | 谢志雄;唐纬坤 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430072*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于细菌遗传转化的纳米材料遗传毒性检测方法，其步骤：A、将待检测的纳米材料与质粒DNA共同孵育：将质粒DNA等量分装于经过灭菌的管中，分别加入待检测的纳米材料，混匀后，将微量离心管置于黑暗条件下孵育；B、质粒DNA回收：孵育后，通过胶回收试剂盒回收质粒DNA并除去纳米材料；C、大肠杆菌感受态状态细胞制备：使用标准的氯化钙方法制备大肠杆菌DH5α菌株的感受态状态细胞；D、大肠杆菌感受态状态细胞的转化：利用回收得到的质粒DNA转化大肠杆菌DH5α菌株的感受态状态细胞；E、转化子计数及转化效率计算；本方法检测装置简单，操作方便，全面提高了纳米材料遗传毒性的分析速度和精确度，易于实现纳米材料遗传毒性数据库的建立。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 细菌 遗传 转化 纳米 材料 毒性 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种基于细菌遗传转化的纳米材料遗传毒性检测方法，其步骤是：A、将待检测的纳米材料与pUC18质粒DNA共同孵育：将pUC18质粒DNA等量分装于经过灭菌的1.5 mL微量离心管中，分别加入待检测的纳米材料，轻微混匀后，将微量离心管置于4°C黑暗条件下孵育；B、pUC18质粒DNA回收：孵育1‑24 h之后，通过胶回收试剂盒回收质粒DNA并除去纳米材料；C、大肠杆菌感受态状态细胞制备：使用标准的氯化钙方法制备大肠杆菌DH5α菌株的感受态状态细胞；D、大肠杆菌感受态状态细胞的转化：利用回收得到的pUC18质粒DNA转化大肠杆菌DH5α菌株的感受态状态细胞；E、转化子计数及转化效率计算：统计选择平板上的转化子数目，通过公式计算转化效率：转化效率=转化子数目/pUC18质粒DNA质量mg；F、比较与纳米材料共同孵育的质粒DNA和未与纳米材料共同孵育的质粒DNA对照样品的转化效率，评估纳米材料的遗传毒性。
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